[發明專利]軍團菌無炭培養基

在審

• 申請號: 201980055071.2
• 申請日: 2019-08-23
• 公開（公告）號: CN112888790A
• 公開（公告）日: 2021-06-01
• 發明（設計）人: 維多利亞·簡·查克爾;歐文·布拉德·斯皮勒;愛德華·波特爾
• 申請（專利權）人: 英國衛生與社會保障部
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04
• 代理公司: 北京驥馳知識產權代理有限公司 11422
• 代理人: 唐曉峰

1.一種體外培養軍團菌的方法，包括將軍團菌在無炭固體瓊脂培養基上孵育，所述培養基包含：

a)血清，其中血清的濃度為1％-35％(v/v)；

b)氮源；和

c)鐵源。

2.無炭固體瓊脂培養基在軍團菌培養中的用途，其中，無炭固體瓊脂培養基包含：

a)血清，其中血清的濃度為1％-35％(v/v)；

b)氮源；和

c)鐵源。

3.鑒定適合抑制軍團菌生長的抗生素的篩選方法，包括：

a)使軍團菌屬細菌與無炭固體瓊脂培養基接觸以提供測試樣品，其中無炭固體瓊脂培養基包含：

i.血清，其中血清的濃度為1％-35％(v/v)；

ii.氮源；和

iii.鐵源；

b)在候選抗生素存在下孵育測試樣品；和

c)當孵育后測試樣品中所述軍團菌的細菌接種量低于對照樣品中軍團菌的細菌接種量時，將所述候選抗生素鑒定為適合抑制軍團菌的生長，其中所述對照樣品在無所述候選抗生素存在下孵育；或者

d)當孵育后測試樣品中所述軍團菌的細菌接種量等于或大于對照樣品中軍團菌的細菌接種量時，將所述候選抗生素鑒定為不適合抑制軍團菌的生長，其中所述對照樣品在無所述候選抗生素存在下孵育。

4.試劑盒，其包含用于培養軍團菌的無炭固體瓊脂培養基和/或用于制備用于培養軍團菌的無炭固體瓊脂培養基的試劑，其中：

a)所述無炭固體瓊脂培養基包含：

i.血清，其中血清的濃度為1％-35％(v/v)；

ii.氮源；和

iii.鐵源；和/或

b)所述試劑包含：

i.瓊脂

ii.血清；

iii.氮源；和

iv.鐵源；和

其中所述試劑盒進一步包含在所述無炭固體瓊脂培養基上培養軍團菌細菌的說明書。

5.根據權利要求4所述的試劑盒用于培養軍團菌的用途。

6.根據權利要求3所述的方法，其中，所述方法還包括將步驟(c)和/或步驟(d)中獲得的數據記錄在合適的數據載體上的步驟。

7.根據前述權利要求中任一項所述的方法、用途或試劑盒，其中所述氮源選自酵母提取物、牛肉提取物、肝臟提取物、酪蛋白水解產物、植物細胞提取物、大豆提取物或其任何組合中的一種或多種；優選地，其中所述氨基酸源是酵母提取物。

8.根據前述權利要求中任一項所述的方法、用途或試劑盒，其中所述鐵源是螯合鐵和/或焦磷酸鐵。

9.根據前述權利要求中任一項所述的方法、用途或試劑盒，其中：

a)瓊脂的濃度為0.2％-5％(w/v)；

b)氮源的濃度為0.2％-10％(w/v)；和/或

c)鐵源的濃度為0.01％-0.1％(w/v)。

10.根據前述權利要求中任一項所述的方法、用途或試劑盒，其中所述無炭固體瓊脂培養基還包含一種或多種選自以下的試劑：

a)緩沖劑，優選其中所述緩沖劑選自N-(2-乙酰胺基)-2-氨基乙烷磺酸(ACES)緩沖劑、氫氧化鉀或其組合；

b)α-酮戊二酸；和/或

c)半胱氨酸。

11.根據權利要求10所述的方法、試劑盒或用途，其中：

a)緩沖液的濃度為1mM-500mM；

b)α-酮戊二酸的濃度為0.001％-1％(w/v)；和/或

c)半胱氨酸的濃度為1％-10％(w/v)。

12.根據前述權利要求中任一項所述的方法、用途或試劑盒，其中所述血清是選自馬血清、綿羊血清、山羊血清、牛血清、胎牛血清、小牛血清、小鼠血清、大鼠血清、豬血清、豚鼠血清、豬血清和兔血清中的一種或多種。