[發明專利]免疫學檢測肺炎支原體的方法

在審

• 申請號: 201980051975.8
• 申請日: 2019-08-05
• 公開（公告）號: CN112513638A
• 公開（公告）日: 2021-03-16
• 發明（設計）人: 落合泰史;中村知史
• 申請（專利權）人: 積水醫療株式會社
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/543
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 崔巍;張瑩

本發明解決以下問題，提供以免疫學檢測方法的用于檢測肺炎支原體的具有高靈敏度的方法，在免疫學檢測方法中使用針對肺炎支原體P30蛋白的抗體進行免疫反應。提供使用針對肺炎支原體P30蛋白的抗體用于免疫學檢測肺炎支原體的方法，其中，在聚氧乙烯烷基胺的存在下進行免疫反應。附加地，作為免疫學檢測方法提供了使用免疫層析的檢測方法。

技術領域

本發明涉及免疫學檢測肺炎支原體(Mycoplasma pneumoniae)的方法。具體地，本發明涉及使用針對肺炎支原體蛋白P30的抗體免疫學檢測肺炎支原體的方法。

背景技術

支原體肺炎為由致病性菌肺炎支原體引起的呼吸系統傳染病。兒童的患病率較高，4歲以下兒童占患者的30％，9歲以下兒童占60％以上。

很多支原體肺炎患者僅僅是承受支氣管炎等，但部分患者嚴重程度提高而伴有肺炎或其他并發癥。因此，快速確診和選擇合適的抗菌藥十分重要，因此，操作簡單、能夠快速檢測的免疫層析是適用的。

例如，專利文獻1公開了使用肺炎支原體蛋白P30特異性單克隆抗體的免疫層析裝置。

此外，專利文獻2公開了使用肺炎支原體核糖體蛋白L7/L12特異性抗體的免疫層析裝置。

附帶說明，當使用抗體進行檢測時，有時在檢測前用表面活性劑等等預處理待檢測的細菌細胞或蛋白質，以暴露由抗體檢測的位點。

專利文獻1公開了試劑盒，在試劑盒中，含有具有13至17的HLB值的非離子表面活性劑的樣本稀釋劑與免疫層析裝置一起使用。然而，雖然有數量巨大的具有13至17的HLB值的非離子表面活性劑，但聚氧乙烯辛基苯基醚(曲拉通X-100)和聚氧乙烯山梨醇酐月桂酸酯(吐溫20)的1∶1混合物，和聚氧乙烯辛基苯基醚(Nonidet p-40)和聚氧乙烯/聚氧丙烯烷基醚(Nonion MN-811)的1∶1混合物這兩個實例是僅有的在實施例中實際描述的非離子表面活性劑，而數量巨大的具有13至17的HLB值的其他非離子表面活性劑是否能使用，并沒有描述。

此外，根據本發明人的試驗，在使用肺炎支原體P30單克隆抗體的檢測中，以上所述的聚氧乙烯辛基苯基醚(曲拉通X-100)，聚氧乙烯山梨醇酐月桂酸酯(吐溫20)，和聚氧乙烯辛基苯基醚(Nonidet p-40)均未提供足夠的靈敏度。

專利文獻2公開了試劑盒，在試劑盒中，含有聚氧乙烯烷基醚或具有12至15的HLB值的非離子表面活性劑的樣本稀釋劑與免疫層析裝置一起使用。然而，聚氧乙烯十六烷基醚(Brij 58)和合成醇EO加合物(LEOCOL TD90，120)是僅有的在實施例中實際描述的非離子表面活性劑，而具有12至15的HLB值的數量巨大的其他非離子表面活性劑并沒有公開。此外，針對肺炎支原體核糖體蛋白L7/L12的抗體是僅有的進行試驗的抗體，而沒有公開或暗示非離子表面活性劑對于P30蛋白的抗體的任何影響。

此外，根據本發明人的試驗，在使用肺炎支原體P30單克隆抗體的檢測中，在向樣本稀釋劑中添加聚氧乙烯十六烷基醚(Brij 58)或合成醇EO加合物(LEOCOL TD90，120)的任一情況下，均沒有提供足夠的靈敏度。

因此，在使用針對肺炎支原體蛋白P30的抗體的免疫學檢測肺炎支原體的方法中仍然待建立一種用于高靈敏/敏感性檢測的技術。

現有技術文獻

專利文獻

專利文獻1：JP 2017-009571 A

專利文獻2：JP 2014-167439 A

發明內容

技術問題

本發明的目的是提供免疫學檢測方法，所述方法包括使用針對肺炎支原體蛋白P30的抗體進行免疫反應，其中肺炎支原體以高靈敏度檢測。

解決問題的方法