[發明專利]使用重組瘧疾蛋白VAR2CSA分離胎兒來源的循環細胞

在審

• 申請號: 201980046629.0
• 申請日: 2019-07-12
• 公開（公告）號: CN112789504A
• 公開（公告）日: 2021-05-11
• 發明（設計）人: A·薩拉蒂;M·道加德
• 申請（專利權）人: 瓦克特診斷有限責任公司
• 主分類號: G01N33/50
• 分類號: G01N33/50;G01N33/68
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 李程達

1.一種用于鑒定生物樣品中的滋養層和/或胎兒細胞的方法，所述方法包括：

a)使包含表達CSA的滋養層和/或胎兒細胞的生物樣品與VAR2CSA多肽或其綴合物或融合蛋白接觸；

b)檢測與所述表達CSA的滋養層和/或胎兒細胞特異性結合的所述VAR2CSA多肽或其綴合物或融合蛋白。

2.根據權利要求1所述的方法，其進一步包括步驟c)：從所述生物樣品中分離與所述VAR2CSA多肽或其綴合物或融合蛋白特異性結合的所述表達CSA的滋養層和/或胎兒細胞。

3.根據權利要求1或2中任一項所述的方法，其進一步包括在先的步驟：從受試者例如妊娠的雌性受試者例如人類女性受試者獲得包含表達CSA的滋養層和/或胎兒細胞的生物樣品。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的方法，其中所述生物樣品是外周血或包含外周血。

5.根據權利要求1-4中任一項所述的方法，其中所述生物樣品來源于妊娠的雌性受試者例如人類女性受試者。

6.根據權利要求1-5中任一項所述的方法，所述方法檢測妊娠的雌性例如人類女性受試者的外周血中的循環滋養層和/或胎兒細胞。

7.根據權利要求1-6中任一項所述的方法，其中所述VAR2CSA多肽或其綴合物或融合蛋白包含可檢測標記或診斷效應部分，例如熒光或放射性標記，和/或用于檢測的承載體，例如磁珠。

8.根據權利要求1-7中任一項所述的方法，其中所述VAR2CSA多肽包含SEQ ID NO：55或SEQ ID NO：56或其具有結合可以呈現在蛋白聚糖(CSPG)上的硫酸軟骨素A(CSA)的能力的片段或變體或由其組成。

9.根據權利要求1-8中任一項所述的方法，其中所述VAR2CSA多肽是VAR2CSA的片段，其由以下連續氨基酸序列組成：

a.ID1，和

b.DBL2Xb，和任選地

c.ID2a。

10.根據權利要求1-9中任一項所述的方法，其中所述VAR2CSA多肽結合蛋白聚糖(CSPG)上的硫酸軟骨素A(CSA)的以KD測量的親和力低于100nM，例如低于80nM，例如低于70nM，例如低于60nM，例如低于50nM，例如低于40nM，例如低于30nM，例如低于26nM，例如低于24nM，例如低于22nM，例如低于20nM，例如低于18nM，例如低于16nM，例如低于14nM，例如低于12nM，例如低于10nM，例如低于9nM，例如低于8nM，例如低于7nM，例如低于6nM或低于4nM。

11.根據權利要求1-10中任一項所述的方法，其中所述VAR2CSA多肽包含與以下序列中的任何一個氨基酸序列具有至少70、75、80、85、90或95％的序列同一性的氨基酸序列：SEQID NO：1的1-577，SEQ ID NO：3的1-592，SEQ ID NO：4的1-579，SEQ ID NO：5的1-576，SEQID NO：10的1-586，SEQ ID NO：11的1-579，SEQ ID NO：29的1-565，SEQ ID NO：34的1-584，SEQ ID NO：36的1-569，SEQ ID NO：37的1-575，SEQ ID NO：38的1-592，SEQ ID NO：41的1-603，SEQ ID NO：43的1-588，SEQ ID NO：44的1-565，SEQ ID NO：45的1-589，SEQ ID NO：48的1-573，SEQ ID NO：53的1-583，SEQ ID NO：54的1-569。