[發明專利]高效表達的EGFR和PD-L1雙特異性結合蛋白

在審

• 申請號: 201980046233.6
• 申請日: 2019-07-08
• 公開（公告）號: CN112513077A
• 公開（公告）日: 2021-03-16
• 發明（設計）人: 吳辰冰;宮世勇
• 申請（專利權）人: 上海岸邁生物科技有限公司
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;C07K16/22;C07K16/28;A61K39/395
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 陳迎春;黃革生

1.一種Fabs-In-Tandem免疫球蛋白(FIT-Ig)結合蛋白，其結合EGFR和PD-L1，并包含第一多肽鏈、第二多肽鏈和第三多肽鏈，其中：

所述第一多肽鏈從氨基末端到羧基末端包含VL_EGFR-CL-VH_PD-L1-CH1-Fc，其中VL_EGFR是結合EGFR的第一親本抗體的抗體輕鏈可變結構域，CL是抗體輕鏈恒定結構域，VH_PD-L1是結合PD-L1的第二親本抗體的抗體重鏈可變結構域，CH1是抗體重鏈的第一恒定區，Fc是抗體Fc區；其中CL直接融合至VH_PD-L1，其中在可變結構域和恒定結構域之間沒有插入人工接頭，并且其中：

VL_EGFR包含SEQ ID NO：1的氨基酸殘基1-107，

VH_PD-L1包含SEQ ID NO：1的氨基酸殘基215-331；

第二多肽鏈從氨基末端到羧基末端包括VH_EGFR-CH1，其中VH_EGFR是結合EGFR的所述第一親本抗體的抗體重鏈可變結構域，其中CH1是抗體重鏈的第一恒定結構域，其中在VH_EGFR和CH1之間沒有插入人工接頭，并且其中：

VL_EGFR包含SEQ ID NO：2的氨基酸殘基1-119，

第三多肽鏈從氨基末端到羧基末端包含VL_PD-L1-CL，其中VL_PD-L1是結合PD-L1的所述第二親本抗體的輕鏈可變結構域，其中CL是抗體輕鏈恒定結構域，其中在VL_PD-L1和CL之間沒有插入人工接頭，并且其中：

VL_PD-L1包含SEQ ID NO：3的氨基酸殘基1-107。

2.根據權利要求1所述的FIT-Ig結合蛋白，其中所述結合蛋白是六多肽鏈結合蛋白，其包含兩條所述第一多肽鏈、兩條所述第二多肽鏈和兩條所述第三多肽鏈，其中所述多肽鏈結合以形成四個Fab結合單元，其中兩個Fab結合單元結合EGFR，兩個Fab結合單元結合PD-L1。

3.根據權利要求1或權利要求2所述的FIT-Ig結合蛋白，其中所述第一多肽鏈和所述第三多肽鏈中的所述抗體CL結構域源自人IgG1抗體。

4.根據權利要求1或權利要求2所述的FIT-Ig結合蛋白，其中所述第一多肽鏈和所述第三多肽鏈中的所述抗體CL結構域包含SEQ ID NO：1的氨基酸殘基108-214。

5.根據權利要求1或權利要求2所述的FIT-Ig結合蛋白，其中存在于所述第一多肽鏈和所述第二多肽鏈中的所述抗體CH1結構域源自人IgG1抗體。

6.根據權利要求1或權利要求2所述的FIT-Ig結合蛋白，其中存在于所述第一多肽鏈和所述第二多肽鏈中的所述抗體CH1結構域包含SEQ ID NO：1的氨基酸殘基332-434。

7.根據權利要求1或權利要求2所述的FIT-Ig結合蛋白，其中存在于所述第一多肽鏈中的所述抗體Fc源自人IgG1抗體。

8.根據權利要求1或權利要求2所述的FIT-Ig結合蛋白，其中存在于所述第一多肽鏈中的所述抗體Fc包含SEQ ID NO：1的氨基酸殘基435-661。

9.根據權利要求1或權利要求2所述的FIT-Ig結合蛋白，其中：

所述第一多肽鏈包含根據SEQ ID NO：1的氨基酸序列；

所述第二多肽鏈包含根據SEQ ID NO：2的氨基酸序列；和

所述第三多肽鏈包含根據SEQ ID NO：3的氨基酸序列。

10.根據權利要求1所述的EGFR/PD-L1 FIT-Ig結合蛋白，其中所述FIT-Ig結合蛋白同時結合EGFR和PD-L1。