[發明專利]含有脂質體的液態凝血功能檢測試劑

在審

• 申請號: 201980045593.4
• 申請日: 2019-07-05
• 公開（公告）號: CN112368580A
• 公開（公告）日: 2021-02-12
• 發明（設計）人: 門脅淳
• 申請（專利權）人: 美迪恩斯生命科技株式會社
• 主分類號: G01N33/86
• 分類號: G01N33/86
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 謝順星;張晶

本發明提供一種生產批次間的差異小的含有脂質體的液態凝血功能檢測試劑。所述試劑的該脂質體的351nm至最大粒徑值的累積累計值為該脂質體整體的累積累計值的0％以上且小于35％。

技術領域

本發明涉及一種含有脂質體的液態凝血功能檢測試劑。

背景技術

在臨床檢查中，用于檢查由凝血因子的活性引起的病理的凝血功能的檢查為常規進行的檢查。其中，利用含有作為由磷脂構成的雙層膜的脂質體的檢查方法。可列舉出活化部分促凝血酶原激酶時間(APTT)測定、凝血酶原時間(PT)測定、使用了APTT測定或PT測定的凝血因子定量檢查、復合因子(複合因子)測定、抗凝劑的定量檢查等。

脂質體為來自于生物體的由磷脂構成的雙層膜。脂質體被應用于藥物制劑、化妝品材料、體外診斷試劑材料、藥物傳遞系統等。

血液凝固反應通過多個凝血因子的級聯反應來實現，但其大部分反應在磷脂的膜表面上進行。在磷脂的親水基團部分與凝血因子結合方面，磷脂酰絲氨酸(PS)或磷脂酰甘油(PG)等的負電荷是重要的。另一方面，已知起因于磷脂的脂肪酸側鏈的磷脂膜的流動性也會對凝固反應產生較大影響。還已知含有增強流動性的不飽和脂肪酸的脂質體的活性高。

生理性止血，包括因暴露于受傷部位的組織因子(TF)與活化的因子Ⅶ的結合而啟動的外源性凝血途徑、和不依賴于TF而啟動的內源性凝血途徑，出血或病理性血栓的形成被認為是由外源性凝血途徑引起的。APTT在試管內重現該反應，向待測血漿中添加試劑，測定由各凝血因子的活化所產生的凝血酶將纖維蛋白原轉化成纖維蛋白的時間。APTT檢測內源性(因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅷ、Ⅹ、Ⅴ、Ⅱ，纖維蛋白原)異常。也應用于作為APTT異常時的精確檢測的內源性凝血因子活性定量、獲得性血友病以及狼瘡抗凝物的檢測、作為鑒別檢查的凝血糾正試驗、或者肝素給藥的監測。

作為APTT所需的性能，可列舉出對凝血因子或肝素等抗凝劑的高敏感性，但由于APTT為需要以凝固時間的絕對值進行診斷的項目，因此與通常的制作校準曲線得出診斷用數值的項目相比，容易產生生產批次間的差異，因此作為臨床上非常希望的性能，特別需要其試劑的生產批次間的差異小。

關于APTT的生產批次間的差異，此前也實施了各種研究。現有的APTT試劑中，提取大豆等天然來源的磷脂并利用該磷脂制成APTT試劑，通過將磷脂從天然來源轉化為合成品，能夠得到均勻的磷脂，有助于減小生產批次間的差異(非專利文獻1)。然而，生產批次間的差異并沒有完全消除，可以說對于應對臨床需求而言，仍然存在改進的余地。

例如，專利文獻1中記載了用0.6μm的聚碳酸酯制薄膜進行過濾從而使脂質體的粒徑均一化，由此得到含有脂質體的溶液。這是在將組織因子重構為合成脂質體之前的操作，并且是進行冷凍干燥之前的操作，因此難以認可最終產品能夠表現出用聚碳酸酯膜過濾而使粒徑均一化的效果。此外，專利文獻1中示出的效果是針對抑制冷凍干燥前后的凝血酶原時間的測定值的變動(差)的，并未控制每個生產批次的凝固時間的絕對值。

現有技術文獻

專利文獻

專利文獻1：日本特開2017-181265號公報

非專利文獻

非專利文獻1：奧田昌弘、菊川紀弘、上村八旬《合成リン脂質を用いた新しいAPTT試薬の開発》、日本検査血液學會雑誌、2002年02月28日、第3卷、第1號、p.124-131、別刷

發明內容

本發明要解決的技術問題

本發明是鑒于上述問題而完成的，本發明提供一種生產批次間的差異小、含有脂質體的液態凝血功能檢測試劑。

解決技術問題的技術手段