[發明專利]轉錄激活因子/阻遏因子GIS1在酵母中的過表達用于增加乙醇生產在審
| 申請號： | 201980045133.1 | 申請日： | 2019-05-21 |
| 公開（公告）號： | CN112384609A | 公開（公告）日： | 2021-02-19 |
| 發明（設計）人： | D·J·馬庫爾;P·J·M·特尼森;Q·Q·朱 | 申請（專利權）人： | 丹尼斯科美國公司 |
| 主分類號： | C12N1/18 | 分類號： | C12N1/18;C12N1/16;C12P7/06;C07K14/395 |
| 代理公司： | 北京市中咨律師事務所 11247 | 代理人： | 張莉;黃革生 |
| 地址： | 美國加利*** | 國省代碼： | 暫無信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 轉錄 激活 因子 阻遏 gis1 酵母 中的 表達 用于 增加 乙醇 生產 | ||
1.一種衍生自親本酵母細胞的經修飾的酵母細胞，所述經修飾的細胞包含遺傳改變，所述遺傳改變引起所述經修飾的細胞與親本細胞相比產生增加量的GIS1多肽，其中在相同發酵條件下與親本細胞產生的醇量相比所述經修飾的細胞在發酵過程中產生增加量的醇。
2.如權利要求1所述的經修飾的細胞，其中所述遺傳改變包括將核酸引入親本細胞中，所述核酸能夠指導GIS1多肽以高于等同條件下生長的親本細胞的水平表達。
3.如權利要求1所述的經修飾的細胞，其中所述遺傳改變包括引入用于表達GIS1多肽的表達盒。
4.如權利要求1所述的經修飾的細胞，其中所述遺傳改變包括引入外源YDR096W基因。
5.如權利要求2所述的經修飾的細胞，其中所述遺傳改變包括在內源YDR096W基因中引入更強的啟動子。
6.如權利要求1-5中任一項所述的經修飾的細胞，其中與在等同條件下生長的親本細胞中的表達水平相比，GIS1多肽表達的增加量為至少約10倍。
7.如權利要求1-5中任一項所述的經修飾的細胞，其中與在等同條件下生長的親本細胞中的水平相比，產生的編碼GIS1多肽的mRNA的增加量為至少約10倍。
8.如權利要求1-7中任一項所述的經修飾的細胞，其中所述細胞進一步包含編碼碳水化合物加工酶的外源基因。
9.如權利要求1-8中任一項所述的經修飾的細胞，其進一步包含甘油途徑和/或乙酰輔酶A途徑中的改變。
10.如權利要求1-9中任一項所述的經修飾的細胞，其進一步包含用于制備乙醇的備選途徑。
11.如權利要求1-10中任一項所述的經修飾的細胞，其中所述細胞屬于酵母屬物種(Saccharomyces spp)。
12.一種用于增加生長于碳水化合物底物上的酵母細胞的乙醇生產的方法，所述方法包括：將遺傳改變引入親本酵母細胞，從而使經修飾的細胞與親本細胞相比產生增加量的GIS1，其中在等同發酵條件下所述經修飾的細胞與在其他方面相同的親本細胞相比產生增加量的乙醇。
13.如權利要求12所述的方法，其中所述遺傳改變包括將核酸引入親本細胞中，所述核酸能夠指導GIS1以高于等同條件下生長的親本細胞的水平表達。
14.如權利要求12所述的方法，其中所述遺傳改變包括引入用于表達GIS1的表達盒。
15.如權利要求12-14中任一項所述的方法，其中所述細胞進一步包含磷酸轉酮酶途徑的一個或多個基因。
16.如權利要求15所述的方法，其中所述磷酸轉酮酶途徑的基因選自由以下組成的組：磷酸轉酮酶、磷酸轉乙酰酶、和乙酰化乙酰基脫氫酶。
17.如權利要求12-16中任一項所述的方法，其中基于編碼GIS1的mRNA表達，與在等同條件下生長的親本細胞中的表達水平相比，GIS1表達的增加量為至少10倍。
18.如權利要求12-17中任一項所述的方法，其中所述細胞進一步包含編碼碳水化合物加工酶的外源基因。
19.如權利要求12-18中任一項所述的方法，其中所述細胞進一步包含在甘油途徑和/或乙酰輔酶A途徑中的改變。
20.如權利要求12-19中任一項所述的方法，其中所述細胞進一步包含用于制備乙醇的備選途徑。
21.如權利要求12-20中任一項所述的方法，其中所述細胞屬于酵母屬物種。
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