[發明專利]制備在液體藥物組合物中高度穩定的具有治療活性的阿地白介素的方法

在審

• 申請號: 201980039901.2
• 申請日: 2019-06-13
• 公開（公告）號: CN113166221A
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發明（設計）人: J·M·羅德里格斯;C·齊爾伯伯格
• 申請（專利權）人: 阿科隆生物技術有限責任公司
• 主分類號: C07K14/55
• 分類號: C07K14/55;A61K38/00;C07K1/16;C07K1/20;C07K1/34;C07K1/36
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 左路;林曉紅

本發明涉及阿地白介素/SDS聚集體的液體藥物組合物及其在治療自身免疫性疾病、炎性病癥和癌癥中的用途。還描述了制備所述組合物的方法。

相關申請的交叉引用

本申請要求2018年6月13日提交的美國臨時申請No：62/684,288(其以引用的方式整體并入本文)在35 U.S.C.§119(e)下的優先權的權益。

技術領域

本發明涉及包含在溶液中穩定的阿地白介素/SDS聚集體的新藥物組合物及其藥物用途。

背景技術

白介素2(IL-2)是調節T細胞和NK細胞的存活、增殖和分化的關鍵細胞因子(1)。這些生物學活性的發現導致IL-2在1994年被批準用于轉移性腎癌的癌癥免疫治療的臨床應用，1998年被批準用于轉移性黑素瘤的臨床應用。此后，IL-2成為推動從患者的腫瘤中提取的T淋巴細胞(腫瘤浸潤淋巴細胞，TIL)的體外擴增的試劑，所述T淋巴細胞隨后轉移回患者以避免未來癌癥的發展(2)。最近，IL-2也已用于擴增用抗原特異性T細胞受體轉導的T細胞(3)或用于癌癥治療的用嵌合抗原受體(CAR)轉導的T細胞(4)。由于發現IL-2在免疫應答中具有以下雙重功能，最近出現了IL-2醫學應用的新領域：a)眾所周知的作為炎性應答的活化劑的活性，以及b)作為炎性應答的下調因子誘導調節性T細胞(CD4⁺Foxp3⁺Treg細胞)擴增(5)。可通過兩種具有高或低的親和力的IL-2受體的存在以及它們的特定細胞分布來解釋此種看似矛盾的雙重性(5)。此種IL-2的雙重性導致了如下所述的相反的療法：a)如在最初的癌癥治療中一樣以高劑量使用IL-2來刺激免疫應答，以及b)如在自身免疫或炎性病癥的治療中一樣以低劑量使用IL-2來抑制過度或異常的免疫應答。

當前的IL-2的多數臨床應用(如果不是全部的話)是使用稱為阿地白介素(des-ala-2ser125)(PROLEUKIN^TM)的天然IL-2的重組突變形式進行的。美國專利4,604,377教導了如何制備在無菌、穩定的凍干配制物中始終穩定(consistent)的重組IL-2(包括阿地白介素)的藥物組合物，其中重組IL-2與提供體積的水溶性載體(例如甘露醇)和足以確保重組IL-2在水中的溶解度的量的十二烷基硫酸鈉混合。所述配制物適合在水性注射劑中復水，所述注射劑用于腸胃外施用，在人患者中穩定和耐受良好。另一方面，最近在歐洲專利EP 1,688,146B中公開了制備PROLEUKIN^TM產品的過程的詳細描述。

發明簡述

本發明的一個方面是制備在用于對需要IL-2免疫療法的患者進行腸胃外施用的液體藥物組合物中高度穩定的阿地白介素的方法，所述方法一般包括以下步驟：a)發酵用經工程化以高表達阿地白介素基因的表達載體轉染的大腸桿菌(E.coli)菌株，b)破碎細菌，c)收集含有阿地白介素聚集體的包涵體，d)使用SDS清潔劑溶解阿地白介素聚集體，e)用氧化性化合物(例如氯化銅)氧化，f)陶瓷羥基磷灰石色譜，g)用有機腈(例如乙腈)稀釋，h)C4柱HPLC色譜，i)透析過濾(diafiltration)，以及j)過濾滅菌。