[發明專利]微固相提取裝置和方法

有效

• 申請號: 201980034371.2
• 申請日: 2019-05-20
• 公開（公告）號: CN112204390B
• 公開（公告）日: 2023-10-03
• 發明（設計）人: M·吉拉爾;T·S·麥克唐納;J·D·米奇恩茲;J·穆薩基奧;R·穆馬;K·法根;G·C·格哈德
• 申請（專利權）人: 沃特世科技公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;B01D15/38;B01J20/00;G01N30/54;G01N1/40;G01N30/60;G01N30/00;G01N30/88
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 鄒松青;劉茜

可使用樣品小柱（201）進行樣品制備和分離。所述小柱包括具有第一端部和第二端部的圓筒（204）、連接到所述圓筒的第二端部的色譜柱區段（209）以及包含吸附劑材料的色譜柱（205）。所述吸附劑材料包括抗體附接到其上以選擇性地保留分析物的顆粒、蛋白質附接到其上以保留特定類別的抗體的顆粒或酶附接到其上以對特定類別的分子執行特異性修飾的顆粒。所述色譜柱區段可與溫度控制裝置熱連通以便控制所述色譜柱的溫度。

技術領域

本申請要求2018年5月21日提交的名稱為“Micro Solid Phase ExtractionDevices and Methods”的美國臨時專利申請No. 62/674,146和2019年3月20日提交的名稱為“Micro Solid Phase Extraction Devices and Methods”的美國臨時專利申請No. 62/820,902的優先權和權益；這些申請中的每個申請的全部內容據此全文以引用方式并入本文。

技術領域

本技術整體涉及用于執行樣品制備（例如，樣品清洗、濃縮、提取）和分離的裝置和方法，并且具體地涉及使用微固相提取（μSPE）裝置進行的樣品制備和分離。

背景技術

樣品制備在分析復雜樣品諸如生物樣品中起主要作用。例如，血液包含高濃度的蛋白質和脂質，這對于色譜和/或MS分析可能是有害的。因此，需要在分析前對復雜樣品進行樣品凈化（例如，清洗）、提取（例如，濃縮）和分離。

微流體液相色譜（μLC）通常用于痕量分析和高靈敏度分析。μLC可在非常小的樣品上執行，并且在較大體積的樣品不可用或過于昂貴的情況下，μLC可能是特別有意義的。傳統樣品制備方法諸如固相提取（SPE）、蛋白質沉淀（PP）、液-液提取（LLE）和滲析可從多達0.2mL-1mL的樣品開始，該樣品可在處理過程中稀釋至高達0.5mL-10mL的總體積。這些“大體積”樣品制備方法與μLC具有有限的相容性，因為這些方法需要對于μLC而言原本不必要的樣品量，這會引入浪費和過多的成本，并且如果沒有足夠的樣品，則可能妨礙分析。

發明內容

本文提供了用于在小柱中執行樣品的清洗、提取和分離的裝置和方法。例如，μSPE裝置可為溫度受控的以增強色譜性能，或者可用附接有抗體的吸附劑材料進行填充以便選擇性地保留特定分析物。

本技術的一個方面涉及用于樣品的清洗和分離的小柱。小柱包括圓筒，該圓筒具有開放的圓筒第一端部和與圓筒第一端部相對的圓筒第二端部。小柱還包括色譜柱區段，該色譜柱區段具有連接到圓筒第二端部的色譜柱區段第一端部和與色譜柱區段第一端部相對的色譜柱區段第二端部。小柱還包括跨越色譜柱區段的色譜柱，該色譜柱包含吸附劑材料并且具有與圓筒第二端部流體連通的色譜柱第一端部和與色譜柱第一端部相對的色譜柱第二端部。小柱還包括位于色譜柱區段第一端部處并且與色譜柱第一端部流體連通的流動相源端口。吸附劑材料包括抗體附接到其上以選擇性地保留分析物的顆粒、蛋白質附接到其上以保留特定類別的抗體的顆粒或酶附接到其上以對特定類別的分子執行特異性修飾的顆粒。

本技術的上述方面可以包括以下特征中的一者或多者。根據一個實施方案，吸附劑材料包括具有用于選擇性地保留小分子、蛋白質或其他抗體的抗體的顆粒。根據另一個實施方案，吸附劑材料包括蛋白質A、G或L中的一種或多種附接到其上以保留特定類別的抗體的顆粒。根據另一個實施方案，吸附劑材料包括胰蛋白酶、胃蛋白酶、PNGaseF或IdeS中的一種或多種附接到其上以對特定類別的分子執行特異性消化或修飾的顆粒。