[發明專利]用于剝離哺乳動物卵母細胞的微流體系統和方法

有效

• 申請號: 201980033958.1
• 申請日: 2019-04-04
• 公開（公告）號: CN112154031B
• 公開（公告）日: 2023-05-23
• 發明（設計）人: 翁林崠;格洛麗亞·Y·李;穆罕默德·托納
• 申請（專利權）人: 綜合醫院公司
• 主分類號: B01L3/00
• 分類號: B01L3/00;A61B17/00;A61D19/00;A61D19/02;A61D19/04;C12M3/00
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司 11204
• 代理人: 王達佐;洪欣

微流體系統被配置為以自動化和連續的方式處理包括卵丘卵母細胞復合體(COCs)的液體樣品，如原始卵泡液，從而產生從周圍卵丘細胞分離或“剝離的”卵母細胞。系統包括基底和通道，所述通道可具有兩個或更多個子通道。每個通道包括入口、出口，以及一個或多個串聯排布的臺部。每個臺部包括一個或多個膨脹單元以及一個或多個收縮單元。至少一個臺部包括具有有助于從COCs去除卵丘細胞的鋸齒狀的內表面例如齒的收縮單元。

相關申請的交叉引用

本申請要求2018年9月18日遞交的第62/732,884號美國臨時專利申請系列，和2018年4月4日遞交的第62/652,648號美國臨時專利申請系列的權益。兩篇在先申請的完整內容均在此通過引用并入本文。

背景技術

輔助生殖技術(ART)，如體外受精(IVF)，可用于治療不育癥或遺傳問題，并有助于懷孕。在IVF期間，可以從卵巢中取出成熟的卵(卵母細胞)并在實驗室受精。然后，可以將受精卵，稱為胚胎，植入子宮中。IVF涉及幾個步驟：排卵誘導、取卵母細胞、取精、受精和胚胎移植。在常規的IVF中，將卵子與準備好的精子一起放在實驗室盤中的培養基中，其中使卵子和精子自發受精過夜。

胞漿內的精子注射(ICSI)與傳統的IVF的不同之處可能在于，每個卵子都可以在顯微鏡引導下用細針單獨注射單個精子。ICSI已被認為是治療男性因素不育的唯一方法。對于有效的ICSI程序，在顯微注射之前剝離卵母細胞可能很重要，因為卵母細胞可能被數層特化的顆粒細胞(卵丘細胞)包圍，形成卵丘-卵母細胞復合體(COC)。在典型的臨床操作中，可以使用酶促(透明質酸酶)和機械(手動移液)方法的組合來剝離卵母細胞，這可能必須由訓練有素的人員來完成。

發明概述

本公開提供了在輔助人類生殖領域中具有廣泛應用的用于從周圍的卵丘和冠細胞中剝離卵母細胞的微流體系統。該系統包括具有重復的收縮單元和膨脹單元的一個或多個通道。一般而言，將包含COCs的樣品注入系統的入口中，所述包含COCs的樣品是緩沖液或其他液體中的僅COCs的收集物，或者來自患者的包含COCs、血凝塊和不同大小的組織碎屑的原始卵泡液，并且當樣品流過系統的一個或多個通道時，收縮單元和膨脹單元一起工作以促進卵母細胞的剝離。例如，收縮單元可以包括表面特征，如鋸齒狀的或平滑的內表面，用于向COCs施加機械力。在一些實施方式中，膨脹單元促進COCs通過系統時的滾動。在一些實施方案中，系統的配置方式使得實現了COCs的連續流動。

在一個方面，本公開提供了用于從附著的卵丘細胞剝離卵母細胞的系統。系統包括基底以及通道或兩個或更多個子通道。每個通道包括入口、出口以及在通道內串聯排布的一個或多個臺部。一個或多個臺部中的每個臺部與后面的臺部流體連通。一個或多個臺部中的每個都包括一個或多個膨脹單元以及一個或多個收縮單元。一個或多個臺部中的至少一個臺部包括具有兩個相對的壁的一個或多個收縮單元。相對的壁中的一個或每個包括面朝通道內部的鋸齒狀的表面。鋸齒狀的內表面包括多個齒，其被排布使得第一相對的壁上的多個齒指向第二相對的壁上的多個齒。第一相對的壁上的多個齒的尖端與第二相對的壁上的多個齒的尖端距離相等，例如，齒是并行排布的。

在另一個方面，本公開提供了用于從附著的卵丘細胞剝離卵母細胞的系統，其包括：基底；以及通道，所述通道具有入口、出口以及串聯排布在入口和出口之間的一個或多個臺部，其中每個臺部與后面的臺部流體連通，其中每個臺部包括一個或多個膨脹單元以及一個或多個收縮單元，并且其中至少一個臺部包括每個具有兩個相對的壁的一個或多個收縮單元，其中兩個相對的壁中的至少一個包括包含多個齒的鋸齒狀的內表面。

在一些實施方案中，每個收縮單元中的兩個相對的壁各自包括多個齒，并且其中第一相對的壁上的多個齒指向第二相對的壁上的多個齒。例如，第一相對的壁上的多個齒的尖端和第二相對的壁上的多個齒的尖端可以并行排布，并且第一和第二相對的壁上的齒的尖端之間的距離可以大約為待剝離的卵母細胞的直徑。

在一些實施方案中，至少一個臺部包括與一個或多個收縮單元交替的一個或多個膨脹單元。