[發明專利]復用型催化報告分子沉積在審
| 申請號： | 201980031776.0 | 申請日： | 2019-06-06 |
| 公開（公告）號： | CN112105743A | 公開（公告）日： | 2020-12-18 |
| 發明（設計）人： | M·博布羅;S·亨內克;M·馬內斯 | 申請（專利權）人： | 烏爾蒂維尤股份有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6804 | 分類號： | C12Q1/6804;C12Q1/682 |
| 代理公司： | 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038 | 代理人： | 劉曉東 |
| 地址： | 美國馬*** | 國省代碼： | 暫無信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 復用型 催化 報告 分子 沉積 | ||
1.一種用于測試樣品中一種或多種靶標的存在的方法，其包括：
(1)使正測試一種或多種靶標的存在的樣品與一種或多種靶標特異性結合配偶體接觸，其中每種靶標特異性結合配偶體連接到核酸鏈，并且其中具有不同特異性的靶標特異性結合配偶體連接到不同的核酸鏈；
(2)在一個或兩個步驟中，使所述樣品與(a)連接到核酸鏈的酶和(b)中間部分接觸，所述中間部分包含能夠與連接到所述靶標特異性結合配偶體的所述核酸鏈特異性結合的第一結構域；和能夠與連接到所述酶的所述核酸鏈特異性結合的第二結構域；
(3)使來自步驟(2)的所述樣品與包含可檢測地標記的底物的底物綴合物接觸，其中所述底物和所述可檢測標記任選地使用可釋放接頭來連接；
(4)任選地使所述結合的酶失活；
(5)任選地檢測來自所述結合的可檢測標記的信號；以及
(6)任選地重復步驟(1)-(5)或其子集，并且在成像的步驟(5)之前任選地重復步驟(3)-(4)或其任何子集。
2.如權利要求1所述的方法，其中所述中間部分的第二區域包含重復序列，每個所述序列都直接或間接地與連接到所述酶的所述核酸鏈的對應序列特異性結合。
3.如權利要求1所述的方法，其中所述方法還包括通過核酸擴增反應來擴增與連接到步驟(1)的所述靶標特異性結合配偶體的所述核酸鏈結合的所述中間部分，以形成重復序列的擴增子，每個所述序列都直接或間接地與連接到所述酶的所述核酸鏈的對應序列特異性結合。
4.如權利要求3所述的方法，其中所述核酸擴增反應包括基于發夾的串聯聚合反應或基于發夾的樹突聚合反應，任選地所述擴增反應是引物交換反應。
5.一種用于測試樣品中一種或多種靶標的存在的方法，其包括：
(1)使正測試一種或多種靶標的存在的樣品與一種或多種靶標特異性結合配偶體接觸，其中每種靶標特異性結合配偶體連接到核酸鏈，并且其中具有不同特異性的靶標特異性結合配偶體連接到不同的核酸鏈；
(2)任選地去除未結合的靶標特異性結合配偶體；
(3)使來自步驟(1)或任選地步驟(2)的所述樣品與連接到核酸鏈的酶接觸，所述核酸鏈與連接到所述靶標特異性結合配偶體的所述核酸鏈互補；
(4)任選地去除連接到互補核酸鏈的未結合的酶；
(5)使來自步驟(3)或任選地步驟(4)的所述樣品與包含可檢測地標記的底物的底物綴合物接觸，其中所述底物和所述可檢測標記任選地使用可釋放接頭來連接；
(6)任選地去除未結合的底物綴合物；
(7)任選地使所述結合的酶失活；
(8)任選地對所述樣品進行成像以檢測所述結合的可檢測標記；以及
(9)任選地重復步驟(1)-(8)或其任何子集，并且任選地如果使用多于一種靶標特異性結合配偶體，則在成像的步驟(8)之前重復步驟(1)-(7)或其任何子集。
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