[發(fā)明專利]免疫外排體及其使用方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201980031600.5
• 申請(qǐng)日: 2019-03-12
• 公開（公告）號(hào): CN112424219A
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 拉古·卡爾盧里;瓦萊麗·勒布勒
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 得克薩斯州大學(xué)系統(tǒng)董事會(huì)
• 主分類號(hào): C07K14/475
• 分類號(hào): C07K14/475;C07K14/705;C07K16/28;C07K14/755;A61K38/00
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 鄭斌;劉振佳

本文中提供了包含外排體的組合物，所述外排體在其表面上包含免疫調(diào)節(jié)分子，例如ICOSL或OX40L。還提供了使用這樣的外排體治療需要免疫調(diào)節(jié)之疾病(例如癌癥、自身免疫病或感染性疾病)的方法。

相關(guān)申請(qǐng)的引用

本申請(qǐng)要求2018年3月12日提交的美國臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?2/641,523的優(yōu)先權(quán)權(quán)益，其全部內(nèi)容通過引用并入本文。

背景

1.技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明一般地涉及生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、腫瘤學(xué)和免疫學(xué)領(lǐng)域。更特別地，其涉及免疫調(diào)節(jié)外排體及其治療用途。

2.背景技術(shù)

包含外排體的胞外囊泡(extracellular vesicle，EV)是納米尺寸的細(xì)胞內(nèi)通訊載體，其參與數(shù)種生理過程并且包含DNA、RNA和蛋白質(zhì)。已經(jīng)在外排體上以不同頻率鑒定出許多表面蛋白質(zhì)，但是它們大部分不是免疫調(diào)節(jié)性的。已確定樹突細(xì)胞來源的外排體具有輕度的免疫調(diào)節(jié)活性但T細(xì)胞應(yīng)答最小。分離自上皮細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞的外排體通常不是免疫調(diào)節(jié)性的，而是高效地結(jié)合并進(jìn)入其他細(xì)胞。因此，需要開發(fā)具有使T細(xì)胞能夠活化的特定能力的基于外排體的免疫調(diào)節(jié)藥物。

發(fā)明概述

因此，本文中提供了在其表面上具有免疫調(diào)節(jié)分子(例如ICOSL和/或OX40L)的外排體。在一個(gè)實(shí)施方案中，本文中提供了包含外排體的組合物，其中所述外排體在其表面上包含載荷，其中所述載荷是免疫調(diào)節(jié)分子。在一些方面中，免疫調(diào)節(jié)分子是CD80、CD86、PD-L1、PD-L2、HVEM、GAL9、CTLA-4、PD-1、PD-1H、CD160、BTLA、TIM3、KIR、LAG3、A2aR、OX40L、CD27L、CD137L、BAFF、APRIL、CD70、CD40、B7H3、ICOSL、OX40、CD40L、BMCA、TACI、GITR、BAFFR、CD27、CD137、ICOS和/或CD28。在一些方面中，外排體在其表面上包含OX40L。在一些方面中，外排體在其表面上包含ICOSL。在多個(gè)方面中，外排體在其表面上還包含CD47。在一些方面中，外排體的至少50％、60％、70％、80％或90％在其表面上包含免疫調(diào)節(jié)分子。在某些方面，外排體分離自過表達(dá)免疫調(diào)節(jié)分子的細(xì)胞。在一些方面中，外排體分離自有治療需要的患者。

在一些方面中，外排體還包含治療劑作為囊泡內(nèi)載荷。在多個(gè)方面中，治療劑是治療性蛋白質(zhì)、抗體(例如，全長抗體、單克隆抗體、scFv、Fab片段、F(ab’)2、雙抗體、三抗體或微抗體)、抑制性RNA、CRISPR系統(tǒng)或小分子藥物。在一些方面中，治療性蛋白質(zhì)是已知其喪失或失活與待治療疾病相關(guān)的蛋白質(zhì)，例如，如腫瘤抑制劑、激酶、磷酸酶或轉(zhuǎn)錄因子。在一些方面中，抗體結(jié)合胞內(nèi)抗原。這樣的胞內(nèi)抗原可以是其活性對(duì)于細(xì)胞增殖和/或存活是必需的蛋白質(zhì)，例如癌基因。在一些情況下，抗體阻止了抗原的功能。在一些情況下，抗體破壞了蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用。在一些方面中，抑制性RNA是siRNA、shRNA、miRNA或pre-miRNA。在多個(gè)方面中，抑制性RNA阻止了其活性對(duì)于維持某種疾病狀態(tài)是必需的蛋白質(zhì)(例如，如癌基因)的表達(dá)。在其中癌基因是基因的突變形式的情況下，則抑制性RNA可優(yōu)先阻止突變癌基因的表達(dá)而不是野生型蛋白質(zhì)的表達(dá)。在一些方面中，CRISPR系統(tǒng)包含指導(dǎo)RNA和核酸內(nèi)切酶，例如Cas核酸內(nèi)切酶。在一些方面中，小分子藥物是顯像劑。在一些方面中，小分子藥物是化學(xué)治療劑。

在一個(gè)實(shí)施方案中，提供了包含本發(fā)明實(shí)施方案中的任一個(gè)的外排體以及賦形劑的藥物組合物。在一些方面中，該組合物配制成用于腸胃外施用。在一些方面中，該組合物配制成用于靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下或腹膜內(nèi)注射。在一些方面中，該組合物還包含抗微生物劑。在一些方面中，抗微生物劑是苯扎氯銨、芐索氯銨、芐醇、布羅波爾(bronopol)、西曲溴銨、西吡氯銨(cetylpyridinium chloride)、氯己定、氯丁醇、氯甲酚、氯二甲酚、甲酚、乙醇、甘油、海克替啶(exetidine)、咪唑烷脲(imidurea)、苯酚、苯氧乙醇、苯乙醇、硝酸苯汞、丙二醇或硫柳汞。