[發(fā)明專利]微小RNA表達(dá)構(gòu)建體及其用途

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201980030607.5
• 申請(qǐng)日: 2019-04-01
• 公開（公告）號(hào): CN112105731A
• 公開（公告）日: 2020-12-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: K-H·克勞斯;F·羅塞特;P·薩蒙;M·埃雷杉德里尼;R·斯佩克;S·布雷德爾;T·梅蘭波;R·麥博格
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 日內(nèi)瓦大學(xué);日內(nèi)瓦大學(xué)醫(yī)院;蘇黎世大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/113
• 分類號(hào): C12N15/113
• 代理公司: 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 陶家蓉;楊昀

1.一種miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其包含啟動(dòng)子元件、長(zhǎng)度為至少50個(gè)核苷酸的間隔子以及miRNA發(fā)夾。

2.如權(quán)利要求1所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述間隔子的長(zhǎng)度介于50與1000個(gè)核苷酸之間。

3.如權(quán)利要求1所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述間隔子的長(zhǎng)度介于50與900；50與800；100與800；或50與800個(gè)核苷酸之間。

4.如權(quán)利要求1所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述間隔子的長(zhǎng)度為至少60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180或200個(gè)核苷酸。

5.如權(quán)利要求1所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述間隔子相對(duì)于所述啟動(dòng)子元件是異源的。

6.如權(quán)利要求1所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述間隔子包含編碼的開放閱讀框。

7.如權(quán)利要求1所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述間隔子的長(zhǎng)度為至少375個(gè)核苷酸。

8.如權(quán)利要求1所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述啟動(dòng)子是真核啟動(dòng)子。

9.如權(quán)利要求8所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述真核啟動(dòng)子是PolII或PolIII啟動(dòng)子。

10.如權(quán)利要求9所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述真核啟動(dòng)子是Pol II啟動(dòng)子。

11.如權(quán)利要求1所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述啟動(dòng)子是誘導(dǎo)型、組織特異性或細(xì)胞譜系特異性啟動(dòng)子。

12.如權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述啟動(dòng)子元件選自表1的所述啟動(dòng)子元件。

13.如權(quán)利要求12所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述啟動(dòng)子元件與所述EF1α啟動(dòng)子至少80％相同。

14.如權(quán)利要求13所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述EF1α啟動(dòng)子是所述EF1α啟動(dòng)子的剪接變體。

15.如權(quán)利要求14所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述EF1α啟動(dòng)子的所述剪接變體是EF1s。

16.如權(quán)利要求15所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述EF1s啟動(dòng)子具有與SEQ ID NO:45至少80％、85％、90％或95％相同的序列。

17.如權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述間隔子選自表9的所述間隔子。

18.如權(quán)利要求17所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述間隔子與SEQ ID NO:46至少80％相同。

19.如權(quán)利要求18所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述間隔子的序列為SEQ ID NO:46。

20.如權(quán)利要求17所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述間隔子與SEQ ID NO:47至少80％相同。

21.如權(quán)利要求20所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述間隔子的序列為SEQ ID NO:47。

22.如權(quán)利要求17所述的miRNA表達(dá)構(gòu)建體，其中所述間隔子與SEQ ID NO:48至少80％相同。