[發明專利]顆粒、顆粒的制造方法、親和顆粒、包括其的試劑和試劑盒、和檢測目標物質的方法

有效

• 申請號: 201980028653.1
• 申請日: 2019-04-25
• 公開（公告）號: CN112041355B
• 公開（公告）日: 2023-08-22
• 發明（設計）人: 須田榮;中浜數理;山內文生;金崎健吾
• 申請（專利權）人: 佳能株式會社
• 主分類號: C08F220/10
• 分類號: C08F220/10;C08F4/04;C08F8/30;C08F8/34;C08F265/04;G01N33/531;G01N33/545
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 劉強

顆粒包括共聚物，所述共聚物包括在側鏈中具有硫基或仲胺、以及三個或更多個羥基的重復單元A，和在側鏈中具有至少一個反應性官能團用于結合配體的重復單元B，其中抑制非特異性吸附。

技術領域

本發明涉及顆粒、顆粒的制造方法、親和顆粒、包括其的測試試劑和測試試劑盒、和檢測目標物質的方法。

背景技術

在近些年，通過使用由彼此化學結合的顆粒和具有與目標物質相容性的配體形成的親和顆粒廣泛研究了目標物質的純化和量化。期望用于這個目的的顆粒具有對除目標物質之外的物質的吸附(所謂的非特異性吸附性質)低的性質。例如，非專利文獻1公開了通過使用苯乙烯和甲基丙烯酸縮水甘油酯兩種單體的乳液聚合獲得并具有被聚甲基丙烯酸縮水甘油酯覆蓋的表面的樹脂顆粒(下文中為SG顆粒)。專利文獻1(日本專利公開號2014-193972)公開了控制SG顆粒的粒徑的方法。

在SG顆粒中，來源于聚甲基丙烯酸縮水甘油酯的一些環氧基開環形成二醇，并且該二醇的親水性降低了非特異性吸附。同時，在將配體化學結合至SG顆粒表面的情況下，還能夠在沒有進一步處理的情況下使用來源于聚甲基丙烯酸縮水甘油酯的環氧基。然而，經常使用包括將環氧基轉化為其他反應性官能團例如羧基、氨基或硫醇基并隨后使反應性官能團與配體化學反應的工序的方法。特別地，通過將SG顆粒的環氧基轉化為羧基獲得的顆粒是優選形式，因為這樣的顆粒在將配體化學結合到顆粒表面方面具有高通用性。

在近些年，膠乳凝集免疫測定作為簡單且快速的免疫測定引起了注意。這種方法包括將顆粒的分散液與可能含有目標物質(抗原或抗體)的試樣混合，所述顆粒包括作為配體的與其化學結合的抗體或抗原。此時，如果試樣中含有目標物質(抗體或抗原)，則發生顆粒的凝集反應。因此，可通過光學檢測該凝集反應，作為例如在散射光強度、透射光強度或吸光度方面的改變量，從而確定是否存在疾病。在膠乳凝集免疫測定中使用的顆粒如在SG顆粒中優選具有低的非特異性吸附能力和用于固定配體的反應性官能團以便減小誤導的噪聲。

引用列表

專利文獻

PTL1：日本專利公開號2014-193972

PTL2：日本專利公開號2014-153140

非專利文獻

NPL1：Bioseparation?using?affinity?latex(1995)第11-30頁

發明內容

本發明的發明人按照非專利文獻1(Bioseparation?using?affinity?latex(1995)第11-30頁)合成了SG顆粒并進一步使來源于在SG顆粒中包括的甲基丙烯酸縮水甘油酯的環氧基與氨基酸化學反應以獲得其中環氧基轉化成羧基的顆粒。然而，如以上所述獲得的顆粒與SG顆粒相比具有退化的抑制非特異性吸附的能力。同時，已知在SG顆粒上引入羧基的方法。在這個方法中，通過用氨水處理SG顆粒，隨后使經處理顆粒與乙二醇二縮水甘油醚化學反應，并進一步使來源于乙二醇二縮水甘油醚的環氧基與氨基酸化學反應從而獲得這樣的顆粒。以這種方式獲得的顆粒抑制非特異性吸附。然而，因為顆粒表現出過度的分散穩定性，所以顆粒難以凝集并且當顆粒用在膠乳凝集免疫測定中時可能無法獲得足夠靈敏度。此外，還存在化學反應過程在多個階段中進行并且復雜、不適合工業化的問題。

考慮到背景技術和上述問題做出了本發明。具體地，本發明的目的是提供顆粒，所述顆粒具有抑制非特異性吸附的高能力并具有反應性官能團以用于將配體與顆粒表面化學結合。另一個目的是提供以高產量簡單地制造該顆粒的新方法。

根據本發明的顆粒特征在于包括共聚物，所述共聚物包括在側鏈中具有硫醚基或仲胺、以及三個或更多個羥基的重復單元A，和在側鏈中具有至少一個反應性官能團以用于結合配體的重復單元B，其中通過表面上存在的羥基抑制非特異性吸附。

根據本發明的顆粒制造方法特征在于包括：