[發明專利]電子顯微鏡術的傳導固定

在審

• 申請號: 201980016802.2
• 申請日: 2019-01-10
• 公開（公告）號: CN111801565A
• 公開（公告）日: 2020-10-20
• 發明（設計）人: 愛德華多·羅薩-莫利納爾
• 申請（專利權）人: 堪薩斯大學
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/42;H01J37/20
• 代理公司: 北京同達信恒知識產權代理有限公司 11291
• 代理人: 黃志華;石磊

1.一種制備用于微量分析的生物樣品的方法，所述方法包含：

(i)在有效允許鋰鹽滲透到所述生物樣品中的條件下，使所述生物樣品與包含所述鋰鹽的冷凍替代溶液接觸；

(ii)在有效允許第一可聚合樹脂滲透到所述生物樣品中的條件下，使所述生物樣品與所述可聚合樹脂接觸；

(iii)將所述生物樣品置于一定體積的第二可聚合樹脂中；以及

(iv)將所制備的生物樣品加熱至有效固化所述第一可聚合樹脂和所述第二可聚合樹脂的溫度，從而形成三維傳導樣品塊。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述方法進一步包含在步驟(i)之前將所述生物樣品與固定液接觸。

3.根據權利要求2所述的方法，其中所述固定液包含醛。

4.根據權利要求3所述的方法，其中所述醛包含甲醛、多聚甲醛、戊二醛或其組合。

5.根據權利要求3至4中任一項所述的方法，其中基于所述固定液總重量，所述固定液包含有包含2重量％至8重量％的醛的水溶液。

6.根據權利要求5所述的方法，其中所述固定液包含有包含1重量％至3重量％的戊二醛和1重量％至3重量％的多聚甲醛的水溶液。

7.根據權利要求5至6中任一項所述的方法，其中所述水溶液包含生理緩沖液，諸如漢克斯平衡鹽溶液。

8.根據權利要求1至7中任一項所述的方法，其中所述鋰鹽在20℃下在水中的溶解度為至少10g/100mL。

9.根據權利要求1至8中任一項所述的方法，其中所述鋰鹽選自三氟甲磺酸鋰、碳酸鋰、氫氧化鋰、氯化鋰、溴化鋰、檸檬酸鋰、硝酸鋰、苯甲酸鋰、甲酸鋰及其組合。

10.根據權利要求9所述的方法，其中所述鋰鹽包含三氟甲磺酸鋰。

11.根據權利要求1至10中任一項所述的方法，其中所述鋰鹽包含0.1重量％至10重量％的所述冷凍替代溶液，諸如0.5重量％至4重量％的所述冷凍替代溶液或2重量％至3重量％的所述冷凍替代溶液。

12.根據權利要求1至11中任一項所述的方法，其中所述冷凍替代溶液進一步包含氧化固定劑，諸如四氧化鋨。

13.根據權利要求12所述的方法，其中所述氧化固定劑包含0.5重量％至5重量％的所述冷凍替代溶液，諸如2重量％至3重量％的所述冷凍替代溶液。

14.根據權利要求1至13中任一項所述的方法，其中所述冷凍替代溶液進一步包含陰性著色劑，諸如鈾鹽、鉛鹽或其組合。

15.根據權利要求14所述的方法，其中所述冷凍替代溶液進一步包含鈾鹽，諸如乙酸鈾酰。

16.根據權利要求14至15中任一項所述的方法，其中所述冷凍替代溶液進一步包含鉛鹽，諸如檸檬酸鉛。

17.根據權利要求14至16中任一項所述的方法，其中所述陰性著色劑包含0.5重量％至8重量％的所述冷凍替代溶液，諸如2重量％至6重量％的所述冷凍替代溶液。

18.根據權利要求1至17中任一項所述的方法，其中基于所述冷凍替代溶液的總重量，所述冷凍替代溶液包含3重量％至5重量％的乙酸鈾酰和0.1重量％至1重量％的檸檬酸鉛。

19.根據權利要求1至18中任一項所述的方法，其中所述冷凍替代溶液進一步包含媒染劑，諸如單寧酸。