[發明專利]突變β-葡萄糖苷酶

在審

• 申請號: 201980015241.4
• 申請日: 2019-02-21
• 公開（公告）號: CN111770996A
• 公開（公告）日: 2020-10-13
• 發明（設計）人: 掛下大視;柴田望;炭谷順一;馬場祐太朗;谷修治;川口剛司
• 申請（專利權）人: 花王株式會社
• 主分類號: C12N15/56
• 分類號: C12N15/56;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N9/42;C12N15/80;C12P19/02;C12P21/02
• 代理公司: 北京尚誠知識產權代理有限公司 11322
• 代理人: 龍淳

1.一種突變β-葡萄糖苷酶，其中，

選自下述(i)和(ii)，

(i)由在序列編號1所示的氨基酸序列或與其具有至少80％的同一性的氨基酸序列中選自對應于序列編號1的787位的位置、對應于790位的位置、和對應于797位的位置中的至少1個位置的氨基酸殘基被取代為天冬酰胺的氨基酸序列構成，并且具有β-葡萄糖苷酶活性的多肽；

(ii)包含該(i)的多肽，并且具有β-葡萄糖苷酶活性的多肽。

2.如權利要求1所述的突變β-葡萄糖苷酶，其中，

與所述取代前的β-葡萄糖苷酶相比，糖化殘渣吸附性較低。

3.如權利要求1或2所述的突變β-葡萄糖苷酶，其中，

與所述取代前的β-葡萄糖苷酶相比，對于生物質的β-葡萄糖苷酶活性提高。

4.如權利要求2或3所述的突變β-葡萄糖苷酶，其中，

所述取代前的β-葡萄糖苷酶由與序列編號1所示的氨基酸序列至少80％相同的氨基酸序列構成，并且在對應于序列編號1所示的氨基酸序列的787位的位置具有賴氨酸，在對應于790位的位置具有谷氨酸，并在對應于797位的位置具有蘇氨酸。

5.一種多核苷酸，其中，

編碼權利要求1～4中任一項所述的突變β-葡萄糖苷酶。

6.一種載體，其中，

含有權利要求5所述的多核苷酸。

7.一種轉化體，其中，

包含權利要求5所述的多核苷酸或權利要求6所述的載體。

8.如權利要求7所述的轉化體，其中，

所述轉化體為絲狀菌。

9.一種生物質糖化劑，其中，

含有權利要求1～4中任一項所述的突變β-葡萄糖苷酶。

10.一種糖的制造方法，其中，

包括：用權利要求1～4中任一項所述的突變β-葡萄糖苷酶將生物質糖化的步驟。

11.一種突變β-葡萄糖苷酶的制造方法，其中，

所述方法包括：在包含序列編號1所示的氨基酸序列或與其具有至少80％的同一性的氨基酸序列并且具有β-葡萄糖苷酶活性的多肽中，將選自對應于序列編號1的787位的位置、對應于790位的位置、和對應于797位的位置中的至少1個位置的氨基酸殘基取代為天冬酰胺的步驟。

12.如權利要求11所述的方法，其中，

所述突變β-葡萄糖苷酶與所述包含序列編號1所示的氨基酸序列或與其具有至少80％的同一性的氨基酸序列并且具有β-葡萄糖苷酶活性的多肽相比，糖化殘渣吸附性較低。

13.如權利要求11或12所述的方法，其中，

所述突變β-葡萄糖苷酶與所述包含序列編號1所示的氨基酸序列或與其具有至少80％的同一性的氨基酸序列并且具有β-葡萄糖苷酶活性的多肽相比，對于生物質的β-葡萄糖苷酶活性提高。

14.如權利要求11～13中任一項所述的方法，其中，

所述包含序列編號1所示的氨基酸序列或與其具有至少80％的同一性的氨基酸序列并且具有β-葡萄糖苷酶活性的多肽在對應于序列編號1所示的氨基酸序列的787位的位置具有賴氨酸，在對應于790位的位置具有谷氨酸，并在對應于797位的位置具有蘇氨酸。