[發明專利]利用單一熒光通道聚合酶鏈反應設備的多重核酸檢測方法有效
| 申請號: | 201980000712.4 | 申請日: | 2019-04-10 |
| 公開(公告)號: | CN110691853B | 公開(公告)日: | 2022-11-29 |
| 發明(設計)人: | 金仁壽;姜胤成 | 申請(專利權)人: | 尤迪比亞股份有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/686 | 分類號: | C12Q1/686 |
| 代理公司: | 北京聿宏知識產權代理有限公司 11372 | 代理人: | 吳大建;康志梅 |
| 地址: | 韓國忠*** | 國省代碼: | 暫無信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 利用 單一 熒光 通道 聚合 反應 設備 多重 核酸 檢測 方法 | ||
1.一種在單一熒光通道聚合酶鏈反應設備中對2個基因進行檢測的方法,其特征在于,包括:
(a)利用第1基因的TaqMan探針以及第2基因的肽核酸(PNA)探針執行聚合酶鏈反應(PCR)的步驟;第2基因的正向(forward)引物與逆向(reverse)引物的引物比例為1:1;
(b)利用擴增信號(Amplification plot)對第1基因的檢測進行確認之后,利用熔解曲線分析(Melting curve analysis)對第2基因的檢測進行確認的聚合酶鏈反應(PCR)延伸(Extension)步驟。
2.根據權利要求1所述的檢測方法,其特征在于:
步驟(a)中的上述TaqMan探針的使用濃度是1至10pmole/μl。
3.根據權利要求1所述的檢測方法,其特征在于:
步驟(a)中的上述肽核酸(PNA)探針的熔解溫度(Tm)值是30至60℃。
4.根據權利要求1所述的檢測方法,其特征在于:
步驟(a)中的上述肽核酸(PNA)探針的使用濃度是5至50pmole/μl。
5.根據權利要求1所述的檢測方法,其特征在于:
步驟(a)中的聚合酶鏈反應(PCR)是在95℃下執行3分鐘之后再重復執行95℃,30秒,變性(Denaturation)步驟→55℃,30秒,退火(Annealing)步驟→72℃,30秒,延伸(Extension)步驟的過程。
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