[實(shí)用新型]一種基于廣譜性抗體識(shí)別的蔬菜中農(nóng)藥多殘留檢測(cè)試紙條

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201920558755.1
• 申請(qǐng)日: 2019-04-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN210665761U
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-06-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉曉晗;王楠;董欣茹;鄭永輝;劉強(qiáng);楊青青;孫霞;郭業(yè)民
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 山東理工大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/558
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/558;G01N33/531;G01N33/532
• 代理公司: 哈爾濱市陽(yáng)光惠遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 鄧宇

一種基于廣譜性抗體識(shí)別的蔬菜中農(nóng)藥多殘留檢測(cè)試紙條，該試紙條包括PVC底板、樣品墊、金標(biāo)墊、檢測(cè)線(xiàn)、質(zhì)控線(xiàn)、硝基纖維素膜、吸水墊；所述金標(biāo)墊上包被有膠體金標(biāo)記的有機(jī)磷農(nóng)藥廣譜抗體、氨基甲酸酯類(lèi)廣譜抗體和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥廣譜抗體混合物；所述檢測(cè)線(xiàn)包被有機(jī)磷農(nóng)藥通用抗原、氨基甲酸酯類(lèi)通用抗原及擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥通用抗原；所述質(zhì)控線(xiàn)上包被兔抗鼠IgG抗體。通過(guò)對(duì)試紙條的細(xì)節(jié)因素的把控，接近被檢測(cè)農(nóng)藥蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)，從而使其與抗原形成更牢固的結(jié)合物。該試紙條可對(duì)蔬菜、水果等農(nóng)產(chǎn)品中大部分有機(jī)磷農(nóng)藥、氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥及擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥進(jìn)行檢測(cè)，現(xiàn)象直觀，靈敏度高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物工程檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，采用一種基于廣譜性抗體識(shí)別的蔬菜中農(nóng)藥多殘留檢測(cè)試紙條對(duì)蔬菜中多種農(nóng)藥殘留進(jìn)行一次性檢測(cè)。

背景技術(shù)

我國(guó)大部分農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用化學(xué)性農(nóng)藥較多，有時(shí)為使得效果更好會(huì)超標(biāo)使用農(nóng)藥。如果不按規(guī)定的用藥量、次數(shù)、方法或安全間隔期施藥，或施用了不該使用的農(nóng)藥，就會(huì)引起農(nóng)藥超標(biāo)或農(nóng)藥中毒。

在我國(guó)農(nóng)藥中，70％為有機(jī)磷農(nóng)藥，而在我國(guó)生產(chǎn)使用的有機(jī)磷農(nóng)藥中，70％為劇毒、高毒類(lèi)，而且較多是禁止在蔬菜作物上使用的。

擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥是20世紀(jì)70年代研發(fā)的一類(lèi)仿生合成殺蟲(chóng)劑，是一種可以防治多種害蟲(chóng)的廣譜性殺蟲(chóng)劑，具有性質(zhì)穩(wěn)定，不宜光解，無(wú)特殊臭味，觸殺作用強(qiáng)，使用濃度低以及殘效時(shí)間長(zhǎng)等特點(diǎn)。

氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥用作農(nóng)藥的殺蟲(chóng)劑、除草劑、殺菌劑等。

現(xiàn)在實(shí)行的農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法大部分需要通過(guò)有機(jī)溶劑提取凈化和用大型分析儀器進(jìn)行，無(wú)法對(duì)廉價(jià)蔬菜進(jìn)行快速的檢測(cè)。目前，實(shí)驗(yàn)室用于農(nóng)殘檢測(cè)的方法多為色譜方法或毛細(xì)管電泳方法，這類(lèi)方法檢測(cè)的周期長(zhǎng)、成本高、操作不簡(jiǎn)便，樣本制備復(fù)雜，難以及時(shí)快速地進(jìn)行檢測(cè)。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種基于廣譜性抗體識(shí)別的蔬菜中農(nóng)藥多殘留檢測(cè)試紙條的研發(fā)，具體涉及一種在一個(gè)試紙條上實(shí)現(xiàn)抗原抗體特異性結(jié)合從而檢測(cè)農(nóng)藥殘留情況。檢測(cè)過(guò)程相較于市場(chǎng)中存在的農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀，操作簡(jiǎn)單，靈敏度高。本發(fā)明通過(guò)以下步驟來(lái)實(shí)現(xiàn)。

為了達(dá)到一次性檢測(cè)多類(lèi)農(nóng)殘的目的，本發(fā)明方法根據(jù)果蔬中常見(jiàn)的有機(jī)磷、氨基甲酸酯、擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥的共性結(jié)構(gòu)，得到與上述農(nóng)藥具有共性結(jié)構(gòu)的半抗原偶聯(lián)物，分別免疫小鼠，得到識(shí)別有機(jī)磷、氨基甲酸酯、擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥的廣譜抗體。通過(guò)抗原抗體免疫反應(yīng)，使試紙條能快速檢測(cè)出具有特定基團(tuán)的有機(jī)磷、氨基甲酸酯、擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥，無(wú)需針對(duì)每一個(gè)有機(jī)磷、氨基甲酸酯、擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥選擇試紙條逐一測(cè)試。

一種基于廣譜性抗體識(shí)別的蔬菜中農(nóng)藥多殘留檢測(cè)試紙條，該試紙條包括PVC底板、樣品墊、金標(biāo)墊、檢測(cè)線(xiàn)、質(zhì)控線(xiàn)、硝基纖維素膜、吸水墊，其特征在于：所述樣品墊、金標(biāo)墊、檢測(cè)線(xiàn)、質(zhì)控線(xiàn)、硝基纖維素膜、吸水墊均設(shè)置在PVC底板的上方，所述樣品墊設(shè)置在PVC底板的邊緣；硝基纖維素膜上靠近金標(biāo)墊的一端噴涂有檢測(cè)線(xiàn)，靠近吸水墊的一端噴涂有質(zhì)控線(xiàn)，從金標(biāo)墊往吸水墊方向依次為有機(jī)磷農(nóng)藥檢測(cè)線(xiàn)(T1)、氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥檢測(cè)線(xiàn)(T2)、擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥檢測(cè)線(xiàn)(T3)；所述樣品墊和金標(biāo)墊為玻璃纖維膜，金標(biāo)墊上包被有膠體金標(biāo)記的有機(jī)磷農(nóng)藥廣譜抗體、氨基甲酸酯類(lèi)廣譜抗體和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥廣譜抗體混合物，其中，所述有機(jī)磷農(nóng)藥廣譜抗體、氨基甲酸酯類(lèi)廣譜抗體和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥廣譜抗體偶聯(lián)到20～25nm氯金酸膠體顆粒表面所得；所述檢測(cè)線(xiàn)包被有機(jī)磷農(nóng)藥通用抗原、氨基甲酸酯類(lèi)通用抗原及擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥通用抗原；所述質(zhì)控線(xiàn)上包被兔抗鼠IgG抗體。

圖1為所述有機(jī)磷農(nóng)藥通用半抗原；

圖2為所述氨基甲酸酯類(lèi)通用半抗原；

圖3為所述擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)通用半抗原。

本發(fā)明所述檢測(cè)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的膠體金免疫層析試紙條的制備方法，包括以下步驟：