[實用新型]用于植物病原細(xì)菌PCR檢測的PCR管和PCR板

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201920169358.5
• 申請日: 2019-01-30
• 公開（公告）號: CN210065760U
• 公開（公告）日: 2020-02-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 魏霜;劉海軍;梁帆;胡學(xué)難
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心
• 主分類號: C12M1/24
• 分類號: C12M1/24;C12M1/00
• 代理公司: 44374 深圳國新南方知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 姜宇

本實用新型公開了一種用于植物病原細(xì)菌PCR檢測的PCR管和PCR板，PCR管包括底部封閉頂部開口的管體、插設(shè)在管體的管口處的管蓋，管蓋包括蓋合時伸入管體內(nèi)部的連接部和位于管體外部的蓋帽部，連接部靠近蓋帽部的外表面設(shè)有外螺紋，管體靠近管口的內(nèi)表面設(shè)有內(nèi)螺紋，管體的內(nèi)表面位于內(nèi)螺紋下方周向設(shè)有軟膠層，軟膠層環(huán)繞管體一周形成套筒狀結(jié)構(gòu)，蓋合管蓋時，連接部延伸到軟膠層。由于PCR管的管蓋和管體采用螺紋連接和軟膠層密封，雙重密封可以防止管蓋脫離，密封更穩(wěn)固，避免在擴增反應(yīng)結(jié)束后會出現(xiàn)膨脹，管蓋松弛等現(xiàn)象，避免假陽性的出現(xiàn)。同時只需要擰動管蓋，使用比較小的力就能打開和閉合管蓋，操作比較省力。

技術(shù)領(lǐng)域

本實用新型涉及PCR工具技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種用于植物病原細(xì)菌PCR檢測的PCR管和PCR板。

背景技術(shù)

KaryMullis發(fā)明的聚合酶鏈?zhǔn)綌U增反應(yīng)(PCR)技術(shù)是20世紀(jì)80年代分子生物學(xué)領(lǐng)域的一項革命性突破。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，各種核酸檢測技術(shù)在分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、法學(xué)等基礎(chǔ)研究以及醫(yī)學(xué)診斷、食品安全檢測等應(yīng)用領(lǐng)域發(fā)揮著極其重要的作用。目前，常用的核酸擴增方法有基于經(jīng)典PCR和新興的等溫擴增技術(shù)兩大類，如交叉引物恒溫擴增(CPA)、環(huán)介導(dǎo)恒溫擴增(LAMP)、鏈置換擴增(SDA)、依賴解旋酶的擴增(HDA)、重組聚合酶擴增(RPA)、重組酶介導(dǎo)的擴增(RAA)、滾環(huán)擴增(RCA)和快速等溫檢測放大(RIDA)等技術(shù)。由于核酸擴增技術(shù)的高靈敏度，擴增物的產(chǎn)量很高。

近年來，分子檢測技術(shù)的發(fā)展為植物病原細(xì)菌的鑒定提供了更為有力的工具，此項技術(shù)可以直接從DNA層面確定植物病原細(xì)菌，使得病原細(xì)菌的鑒定，病害的診斷變得更為快速準(zhǔn)確。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction，PCR)是一種常用的病菌細(xì)菌分子檢測技術(shù)，由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)做準(zhǔn)備；②模板DNA與引物的退火(復(fù)性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合；③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在72℃，DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基互補配對與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復(fù)制鏈，重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。PCR技術(shù)需要一定的溫度條件和適宜的變性、退火和延伸時間來滿足反應(yīng)要求，過程控制不好，容易出現(xiàn)假陽性或無法擴增目標(biāo)條帶，耗時過長。

現(xiàn)有植物病原細(xì)菌的鑒定PCR檢測中使用的PCR管，保存時都是利用管蓋插接在管體的管口內(nèi)部實現(xiàn)密封，但是現(xiàn)有的PCR管、PCR管板的管體整體都是由一種硬質(zhì)材料制成，材料彈性性能差，密封效果不好，密封不可靠，雖然這樣的結(jié)構(gòu)設(shè)計使PCR管使用時比較方便，但在擴增反應(yīng)結(jié)束后會出現(xiàn)膨脹，管蓋松弛等現(xiàn)象，容易造成實驗室或現(xiàn)場的氣溶膠污染問題，從而使得檢測結(jié)果出現(xiàn)假陽性等問題。這在一定程度上限制了核酸擴增技術(shù)無法更廣泛地推廣與應(yīng)用，尤其對于田間或現(xiàn)場的核酸檢測。為實現(xiàn)更好的密封效果，一般是增強管蓋與管體之間的卡合力度使管蓋與管體之間結(jié)合更緊密，但是這樣就需要使用比較大的力才能打開和閉合管蓋，操作比較費力，使用不方便。因此，開發(fā)一種抗膨脹、嚴(yán)格氣密性且易打開和蓋合操作的PCR管迫在眉睫。

實用新型內(nèi)容

本實用新型要解決的技術(shù)問題是提供一種防止管蓋脫離、提高密封效果且易打開和蓋合操作的用于植物病原細(xì)菌PCR檢測的PCR管和可穩(wěn)定放置PCR管的PCR板。

為了解決上述技術(shù)問題，本實用新型的技術(shù)方案為：