[發明專利]一種表面印跡抗體的疏水電荷誘導模式膜層析介質及其制備方法

有效

• 申請號: 202111170972.1
• 申請日: 2021-10-08
• 公開（公告）號: CN113908589B
• 公開（公告）日: 2022-09-27
• 發明（設計）人: 孟建強;郭淼媛;葉劍龍
• 申請（專利權）人: 天津工業大學
• 主分類號: B01D15/38
• 分類號: B01D15/38;B01J20/26;B01J20/281;B01J20/30
• 代理公司: 天津才智專利商標代理有限公司 12108
• 代理人: 王夢

1.一種表面印跡抗體的疏水電荷誘導模式膜層析介質的制備方法，其特征在于，具體制備步驟如下：

S1、將再生纖維素膜浸泡于氧化劑溶液中，并于20～60℃下攪拌2～6h；取出；

S2、將經過步驟S1處理的膜浸泡在甲醇溶液中，依次加入色胺，對羧基苯磺酰氯，異氰基乙酸甲酯，在25～60℃下攪拌4～12h后取出；

S3、將步驟S2處理的膜放入免疫球蛋白G溶液中，并置于25℃的恒溫混勻儀中吸附5～10h；

S4、將步驟S3處理的膜浸泡在pH＝7的磷酸鹽緩沖液中，依次加入丙烯酰胺、N,N-亞甲基雙丙烯酰胺、配體和催化劑，并置于惰性氣氛下于25～80℃下反應0.5～6h；

S5、依次用pH＝5的乙酸鹽緩沖液、pH＝7的磷酸鹽緩沖液和去離子水充分沖洗經過步驟S4處理的膜，使模板蛋白解吸附，獲得表面印跡抗體的疏水誘導模式膜層析介質。

2.根據權利要求1所述的表面印跡抗體的疏水電荷誘導模式膜層析介質的制備方法，其特征在于，在步驟S1中，再生纖維素膜采用平均孔徑為0.45μm且表面帶有羥基的再生纖維素膜。

3.根據權利要求1所述的表面印跡抗體的疏水電荷誘導模式膜層析介質的制備方法，其特征在于，在步驟S1中，氧化劑溶液為采用高碘酸鈉或2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧基溶于去離子水配制而成的0.5～5wt.％的氧化劑水溶液。

4.根據權利要求1所述的表面印跡抗體的疏水電荷誘導模式膜層析介質的制備方法，其特征在于，在步驟S2中，色胺、對羧基苯磺酰氯、異氰基乙酸甲酯的摩爾加量均過量于經過步驟S1處理的膜上的醛基的摩爾量，且色胺、對羧基苯磺酰氯、異氰基乙酸甲酯的摩爾比為1:1:1。

5.根據權利要求1所述的表面印跡抗體的疏水電荷誘導模式膜層析介質的制備方法，其特征在于，免疫球蛋白G溶液的濃度為0.5～5mg/mL。

6.根據權利要求1所述的表面印跡抗體的疏水電荷誘導模式膜層析介質的制備方法，其特征在于，配體為N,N,N',N,'N”-五甲基二亞乙基三胺或四甲基乙二胺或2,2-聯二吡啶。

7.根據權利要求1所述的表面印跡抗體的疏水電荷誘導模式膜層析介質的制備方法，其特征在于，催化劑為CuCl或CuBr。

8.根據權利要求1所述的表面印跡抗體的疏水電荷誘導模式膜層析介質的制備方法，其特征在于，在步驟S4中，基于每1g經過步驟S3處理的膜，丙烯酰胺、N,N-亞甲基雙丙烯酰胺、配體和催化劑的加入量依次為2g、0.3g、0.13g和0.065g。

9.一種采用上述權利要求1～8中任一項所述的表面印跡抗體的疏水電荷誘導模式膜層析介質的制備方法制備得到的表面印跡抗體的疏水電荷誘導模式膜層析介質。