[發明專利]一種通過piR-57660對弱精癥診斷試劑盒及應用

在審

• 申請號: 201911425770.X
• 申請日: 2019-12-31
• 公開（公告）號: CN113122623A
• 公開（公告）日: 2021-07-16
• 發明（設計）人: 趙藝;陳驍銳;駱陽;夏玉貴;屠盛;林巧芳;高娜
• 申請（專利權）人: 南京優智源醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
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• 代理人: 暫無信息

本發明提供了一種弱精癥標記物及其檢測方法、試劑盒。本發明所提供的弱精癥標記物包括受試者精漿中穩定存在且可檢測的與Piwi蛋白相作用的核糖核酸piR?57660。本發明還提供了包括檢測該弱精癥標記物的工具或元件的試劑盒。本發明所提供的組合、方法、試劑盒能夠用于輔助弱精癥的診斷與鑒別診斷、疾病并發癥的發生和復發的預測、療效評價，以及藥物活性成分的篩選、藥效評價等方面，具有靈敏度高、檢測成本低、取材方便、樣本易存放等優點，該方法可廣泛用于弱精癥普查等相關工作，成為早期診斷弱精癥的有效手段。

技術領域

本發明屬于醫療診斷領域，涉及人精漿中piRNA分子的分離、定性和定量分析。更具體地，本發明是一種檢測弱精癥病人精漿中piR-57660的方法，通過弱精癥病人精漿中piR-57660的變化，體外診斷弱精癥。

背景技術

近年來，由于受到各種因素的影響，導致不育癥患者在不斷增加，不育癥會給患者的身心與生活質量造成嚴重影響，給家庭帶來沉重負擔。隨著人們生活壓力不斷增加，環境污染、生活與飲食方式等發生較大改變，這些因素均與不育癥的發生有著密切聯系。

在不育癥患者中，大多數為少弱精癥患者，其精子活性較低，更甚者無活動能力。在男性中，少精弱精癥是造成男性不育或生育力下降的主要原因之一。弱精癥的原因比較多，是否造成不育，要看弱精癥的程度。

如果是輕度的弱精癥一般對生育沒有大的影響，如果是嚴重的弱精癥要做進一步的檢查，看看引起弱精癥的原因，有沒有前列腺炎導致的弱精癥，有沒有免疫因素導致的弱精癥，查明弱精癥的原因后針對病因治療弱精癥。目前，主要依靠常規精液分析進行診斷，常規精液分析是判斷男性生育能力及診斷弱精癥的臨床指標，但具有步驟復雜，樣本不易存放等缺點。尋找靈敏度高、檢測成本低、取材方便、樣本易存放的診斷技術非常重要。

小分子非編碼RNA(small non-coding RNA)，主要包括tRNA、snRNA、snoRNA、microRNA(miRNA)、siRNA和Piwi-interacting RNA(piRNA)等非編碼蛋白質的RNA分子。隨著對RNA研究的深入，已知小分子非編碼RNA在基因的轉錄、轉錄后調控以及引導染色質修飾復合物中起到了重要的作用。piRNA是從哺乳動物生殖細胞中分離得到的一類長度約26～31nt的小分子非編碼RNA，并且與PIWI蛋白家族成員相結合，在精子形成中起著重要的作用，可以作為不孕不育癥的潛在藥物靶點和診斷標記物。

發明內容

精液作為男性生殖系統的主要代謝產物，可以反映出整個生殖系統的生理病理狀況，其檢測結果對男性生殖健康具有指導意義。已知，精漿中穩定存在多種piRNA，在精子形成中發揮重要作用。

為尋找弱精癥標記物并對其進行準確檢測，本發明人基于已有的研究

(1)研究弱精癥患者的精漿中的piRNA的特異性變化；

(2)通過用于檢測精漿中piRNA的生物芯片測定弱精癥精漿中piRNA的變化；

(3)將篩選到的在弱精癥及正常生理狀態下表達差異較大的piR-57660應用于精漿piRNA檢測技術，制備應用于弱精癥診斷等領域的診斷試劑盒。

通過上述對精漿中piRNA與弱精癥的相關性研究，申請人提出了以精漿中piR-57660作為弱精癥檢測標記物，建立一種體外檢測精漿中穩定存在的特定piRNA的方法，通過檢測piR-57660的特異性變化來進行弱精癥的早期診斷，同時可以進一步進行藥性判斷，用藥指南，個體化治療等研究。

因此，本發明的目的是提供一種弱精癥標記物。

本發明的另一個目的是提供一種用于檢測弱精癥的探針。

本發明的另一個目的是提供上述弱精癥標記物的用途，包括制備相應的試劑盒。

本發明的另一個目的是提供檢測上述弱精癥標記物的方法。