[發明專利]一種抗黑星病、棒孢葉斑病密刺型黃瓜雜交種的選育方法

在審

• 申請號: 201911423522.1
• 申請日: 2019-12-31
• 公開（公告）號: CN111034612A
• 公開（公告）日: 2020-04-21
• 發明（設計）人: 王惠哲;楊瑞環;鄧強;曹明明;李淑菊
• 申請（專利權）人: 天津科潤農業科技股份有限公司
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H1/04;C12Q1/6895
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201
• 代理人: 曹玉平

1.一種抗黑星病、棒孢葉斑病密刺型黃瓜雜交種的選育方法，其特征在于，包括以下步驟：

⑴以密刺型抗棒孢葉斑病黃瓜優良品系為母本，以抗黑星病黃瓜品種津春1號為父本，進行雜交，獲得轉育一代；

⑵轉育一代基因型為抗黑星病雜合型和感黑星病純合型，轉育一代植株經分子標記篩選，篩選出抗黑星病雜合植株，并經田間農藝性狀選擇和鑒定獲得綜合性狀優良單株，以密刺型抗棒孢葉斑病黃瓜優良品系為輪回親本，進行4-8代回交轉育,轉育各代植株均經分子標記篩選，獲得遺傳穩定的抗黑星病、棒孢葉斑病密刺型黃瓜優良品系；

⑶引進一個綜合性狀優良、抗棒孢葉斑病雜交種津優35號，自交1代后獲得F₂代群體，篩選把短、順直、抗病的單株進行自交分離，從中獲得耐低溫、弱光，抗棒孢葉斑病的高代自交系純合植株，篩選出綜合性狀優良的純系；

⑷以步驟(2)獲得的遺傳穩定的抗黑星病、棒孢葉斑病密刺型黃瓜優良品系為母本，以步驟(3)獲得的綜合性狀優良的純系為父本，雜交，獲得雜交一代種；

⑸雜交一代種經過田間種植、組合比較，選育出一種抗黑星病、棒孢葉斑病密刺型黃瓜雜交種。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征是所述分子標記篩選的步驟為：

⑴提取轉育各代植株基因組DNA；

⑵以所述DNA為模板，以InDel引物SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示核苷酸序列為上、下游引物，進行PCR擴增，獲得258bp或283bp核苷酸序列，258bp核苷酸序列包含1個與黃瓜黑星病抗病性相關基因緊密連鎖的InDel位點；283bp核苷酸序列包含1個與黃瓜黑星病感病性相關基因緊密連鎖的InDel位點；

⑶將步驟⑵獲得的核苷酸序列進行測序，測序結果序列大小為283bp，序列如SEQ IDNo.3所示，為感黑星病植株，測序結果序列大小為258bp，序列如SEQ ID No.4所示為純合抗黑星病植株；同時具有SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所述的核苷酸序列，為抗黑星病雜合植株。