[發明專利]一種抗HIV-1 P24的重組抗體

有效

• 申請號: 201911422902.3
• 申請日: 2019-12-31
• 公開（公告）號: CN113121678B
• 公開（公告）日: 2022-11-08
• 發明（設計）人: 崔鵬;何志強;孟媛;鐘冬梅;姜瑢瑢;梁碧;游輝;馬秋燕;李蔚芝
• 申請（專利權）人: 東莞市朋志生物科技有限公司
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;G01N33/569
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 周文波

本發明涉及一種新穎的包含HIV?1 P24抗原結合結構域的分離的結合蛋白，并對該結合蛋白的制備、應用等方面進行研究。所述結合蛋白包括至少一個互補決定區，其活性強，與HIV?1 P24蛋白具有很高的親和力，可廣泛應用于HIV?1 P24蛋白的檢測領域。

技術領域

本發明涉及免疫技術領域，具體而言，涉及一種抗HIV-1 P24的重組抗體。

背景技術

人類免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus；abbr:HIV)，即艾滋病(AIDS，獲得性免疫缺陷綜合征)病毒，是造成人類免疫系統缺陷的一種病毒。1981年，人類免疫缺陷病毒在美國首次發現。它是一種感染人類免疫系統細胞的慢病毒(Lentivirus)，屬逆轉錄病毒的一種。目前，艾滋病不僅已成為嚴重威脅我國人民健康的公共衛生問題，且已影響到經濟發展和社會穩定。

HIV是艾滋病的病原體，主要通過性接觸、血液和母嬰傳播。近年來，HIV感染患者數量一直呈上升趨勢。根據衛生部統計，中國自1985年發現第一例艾滋病病人以來，截至2009年10月底，累計報告艾滋病病毒感染者和病人319877例。2009年當年新發艾滋病病毒感染者4.8萬人，我國艾滋病疫情形勢依然嚴峻，性傳播正成為主要傳播途徑。而目前測定血清HIV抗體是診斷HIV感染的常規實驗方法，但是測定HIV抗體有局限性：有超過70％的HIV感染者在感染6個月后才能檢測出抗體，在同性戀群體，這個數字超過80％，檢測抗體方法增加了HIV“窗口期”傳播的危險；另外新生兒產生抗體需要出生1年后，來自母親的HIV抗體會致使假陽產生；由于HIV抗體在疾病過程中的持續存在，只有到艾滋病晚期時消失，無法作為治療監測的穩定指標。

P24是HIV病毒顆粒的主要結構蛋白，是結構基因GAG的產物，在病毒的包裝和成熟過程中起重要作用。P24蛋白的氨基酸序列在HIV各毒株之間高度保守，缺失P24會導致病毒無法正常組裝。P24蛋白特異性很強，與多數其他逆轉錄病毒無交叉反應。HIV感染人體，感染者血液中首先出現的病毒標志物為病毒P24蛋白，從病毒感染到檢出HIV抗體之間存在較長的窗口期，因此檢測HIV-P24抗原已在HIV感染的早期診斷、患者的預后判斷、篩選和評價抗HIV的藥物，以及發現母嬰傳播等方面發揮了重要作用。

HIV-1 P24抗原的檢測采用血清學診斷方法，主要有雙抗體夾心ELISA法、免疫復合物裂解檢測法、超敏感EIA法、酶聯免疫熒光法等。目前普遍使用雙抗體夾心法檢測人類免疫缺陷病毒P24抗原，具有很好的特異性，但是單純利用物理吸附把單克隆抗體或者多克隆抗體吸附在酶標板上會存在單抗使用量大，活性損失大。傳統的臨床診斷使用的都是鼠源的單克隆抗體，現有的針對HIV-1P24抗原的抗體靈敏度、特異性上都還不夠理想，可選擇性的不多，因此市面上對于高活性高親和力的HIV-1 P24單克隆抗體具有強烈的需求。

有鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明涉及一種新穎的包含HIV-1 P24抗原結合結構域的分離的結合蛋白，并對該結合蛋白的制備、應用等方面進行研究。

其中所述抗原結合結構域包括選自下述氨基酸序列的至少一個互補決定區：或；與下述氨基酸序列的互補決定區具有至少80％的序列同一性且與HIV-1 P24具有K_D≤1.74×10^-9的親和力；

互補決定區CDR-VH1為D-X1-S-F-T-X2-Y-T-X3-H，其中，

X1是S、Y或T，X2是P或A，X3是I或L；

互補決定區CDR-VH2為I-N-P-Y-N-X1-T-S-X2-N-Q-K-F-X3-G，其中，

X1是Q、N或GG，X2是S、Y或T，X3是Q或N；

互補決定區CDR-VH3為A-R-X1-G-Y-D-R-E-G-X2-Y-Y-X3-M-D-Y-X4-G，其中，