[發(fā)明專利]一種犬細(xì)小病毒精制卵黃抗體凍干劑的制備方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201911419945.6 | 申請(qǐng)日： | 2019-12-31 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN111068049A | 公開（公告）日： | 2020-04-28 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 陳慶忠;安同偉;李迎梅 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 天津赫萊恩特生物科技有限公司 |
| 主分類號(hào)： | A61K39/42 | 分類號(hào)： | A61K39/42;A61K9/19;A61K31/715;A61K47/18;A61K47/22;A61K47/26;A61K47/32;A61K47/36;A61K47/42;A61K47/44;A61P31/20 |
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| 地址： | 301702 天津市*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 細(xì)小 病毒 精制 卵黃 抗體 凍干劑 制備 方法 | ||
1.一種犬細(xì)小病毒精制卵黃抗體凍干劑的制備方法，其特征在于：該凍干劑有效組分及其重量份數(shù)比為：黃芪多糖30-50份、蔗糖15-40份、海藻糖5-15份、蜂膠2-5份、谷氨酸1-5份、聚乙烯吡咯烷酮1-2份、維生素C 0.5-1份、大豆蛋白胨1-5份。
2.一種如權(quán)利要求1所述的一種犬細(xì)小病毒精制卵黃抗體凍干劑的制備方法，其特征在于：該制備方法的步驟為：
(1)按照重量配比分別稱取黃芪多糖、蔗糖、海藻糖、蜂膠、谷氨酸、聚乙烯吡咯烷酮、維生素C、大豆蛋白胨，溶于45-65℃蒸餾水中得溶液A；
(2)將步驟(1)中溶液A在120℃下高壓滅菌15-30分鐘，2-8℃保存，得凍干劑；
(3)步驟(2)中所得凍干劑與犬細(xì)小病毒精制卵黃抗體溶液比為按體積比1：5-1：9充分混勻，凍干處理，即得本發(fā)明一種犬細(xì)小病毒精制卵黃抗體凍干劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種犬細(xì)小病毒卵黃抗體凍干劑的制備方法，其特征在于步驟(3)中所述犬細(xì)小病毒卵黃抗體的制備方法的步驟為：
(1)取未經(jīng)免疫的23周齡健康產(chǎn)蛋雞，對(duì)其進(jìn)行犬細(xì)小病毒弱毒疫苗3次免疫注射，免疫間隔為7天，用量0.5ml/只/次，檢測血清抗體效價(jià)至1:256時(shí)收集高免蛋；
(2)取步驟3-(1)所得高免蛋，用清水沖洗干凈后浸入0.1％新潔爾滅水溶液中消毒15分鐘，取出晾干，再用環(huán)氧乙烷氣霧消毒30分鐘后，送入蛋清蛋黃分離機(jī)分離得到卵黃，攪拌得到卵黃勻漿；
(3)對(duì)步驟3-(2)中所得卵黃勻漿中添加1.5倍體積的生理鹽水和濃度為0.1％的正辛酸，邊加邊攪拌0.5～1.5小時(shí)，室溫放置2～6小時(shí)后，以4200～5500r/min的轉(zhuǎn)速離心30min，丟棄沉淀，在上清液中加入1.2％硫酸酯葡聚糖，攪拌10-20分鐘，用孔徑5μm和1μm的筒式濾芯過濾上清液，再經(jīng)截留分子量為10kD的中空纖維超濾柱進(jìn)行濃縮3～4倍后再用NaOH調(diào)整PH值為6.8～7.0，并以0.45μm和0.22μm筒式濾芯過濾除菌，得抗體效價(jià)1:256的濾液，即犬細(xì)小病毒精制卵黃抗體溶液。
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