[發(fā)明專(zhuān)利]質(zhì)譜檢測(cè)乳制品中A1、A2型β酪蛋白的質(zhì)譜模型及其構(gòu)建方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911419408.1
• 申請(qǐng)日: 2019-12-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111077214A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-04-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 呂倩;何昆;付書(shū)輝;陳蓮蓮;馬慶偉;向華
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 北京毅新博創(chuàng)生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N27/62
• 分類(lèi)號(hào): G01N27/62;G01N33/68
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種用于質(zhì)譜檢測(cè)乳制品中A1β-酪蛋白、A2β酪蛋白的質(zhì)譜模型，該質(zhì)譜模型包括A1β-酪蛋白、A2β酪蛋白的標(biāo)準(zhǔn)特征多肽組，其中所述乳制品包括牛乳、羊乳，所述A1β-酪蛋白、A2β酪蛋白的標(biāo)準(zhǔn)特征多肽序列分別如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2所示。

2.權(quán)利要求1所述的質(zhì)譜模型，其中所述A1β-酪蛋白的特征多肽質(zhì)譜峰值為單電荷5360m/z(5‰)或雙電荷2680m/z(5‰)，當(dāng)出現(xiàn)該單電荷或雙電荷的質(zhì)譜多肽峰值時(shí)，表示待檢樣品為A1型乳，或A1/A2雜合型乳。

3.權(quán)利要求1或2所述的質(zhì)譜模型，其中所述A2β-酪蛋白的特征多肽峰質(zhì)譜峰值為單電荷5320m/z(5‰)或雙電荷2660m/z(5‰)，當(dāng)出現(xiàn)該單電荷或雙電荷的質(zhì)譜多肽峰值時(shí)，表示待檢樣品為A2型乳，或A1/A2雜合型乳。

4.制備權(quán)利要求1-3任一所述的質(zhì)譜模型的構(gòu)建方法，包括：

1)收集多例普通純牛奶(含A1型或A1/A2雜合型)和A2型牛奶作為兩組標(biāo)本備用；

2)對(duì)牛奶蛋白進(jìn)行質(zhì)譜前預(yù)處理；

3)對(duì)預(yù)處理過(guò)的兩組牛奶蛋白進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè)讀取，獲得兩組牛奶多肽的指紋圖譜；

4)對(duì)所有的普通純牛奶(含A1型或A1/A2雜合型)和A2型牛奶的指紋圖譜進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，并收集數(shù)據(jù)；

5)對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行質(zhì)控處理，篩選出具有下列質(zhì)荷比峰的兩個(gè)特征多肽：?jiǎn)坞姾?360m/z(5‰)或雙電荷2680m/z(5‰)、單電荷5320m/z(5‰)或雙電荷2660m/z(5‰)，對(duì)所述特征多肽進(jìn)行測(cè)序并確定其序列為SEQ ID No.1、SEQ IDNo.2所示，并根據(jù)這兩個(gè)質(zhì)荷比峰建立檢測(cè)乳品定性及半定量的質(zhì)譜模型。

5.權(quán)利要求1的構(gòu)建方法，其中步驟2)預(yù)處理的方法包括使用胰蛋白酶酶解，得到乳品中的特異多肽片段。

6.權(quán)利要求1的構(gòu)建方法，其中所述步驟3)采用試劑盒對(duì)兩組乳品樣本進(jìn)行還原、烷基化及酶解處理，并對(duì)乳品酶解后的多肽片段進(jìn)行讀取，獲得兩組乳品多肽的指紋圖譜。

7.權(quán)利要求1的構(gòu)建方法，其中所述步驟5)所述的質(zhì)控處理，保留信噪比大于3的質(zhì)譜圖譜數(shù)據(jù)，并采用組內(nèi)變異系數(shù)來(lái)保證實(shí)驗(yàn)的一致性，從而根據(jù)變異系數(shù)滿足一致性的允許范圍來(lái)進(jìn)行篩選，所述變異系數(shù)為15％。