[發(fā)明專利]一種植物乳桿菌增殖劑及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911418641.8
• 申請日: 2019-12-31
• 公開（公告）號: CN110951654A
• 公開（公告）日: 2020-04-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張楠;葉水文
• 申請（專利權(quán)）人: 南昌諾匯醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/38;C12R1/125
• 代理公司: 南昌卓爾精誠專利代理事務(wù)所(普通合伙) 36133
• 代理人: 徐柳華

本發(fā)明公開了一種植物乳桿菌增殖劑及其應(yīng)用，其為：枯草芽孢桿菌CGMCC 18057發(fā)酵上清液。還可以包括6′?乙酰基人參皂苷F1，所述發(fā)酵上清液為在含有大豆成分的培養(yǎng)基中發(fā)酵獲得的。本發(fā)明提供的增殖劑制備方法簡單，成本低，而且所用的菌株為益生菌，還能增進(jìn)其他保健益生效果；本發(fā)明制備的增殖劑對植物乳桿菌在乳中的生長具有十分顯著促進(jìn)作用，極大的提高了植物乳桿菌的應(yīng)用空間實(shí)際產(chǎn)品開發(fā)中的應(yīng)用潛力。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種植物乳桿菌增殖劑，屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

植物乳桿菌是乳酸菌的一種，最適生長溫度為30～35,厭氧或兼性厭氧,菌種為直或彎的桿狀，單個、有時成對或成鏈狀，最適pH 6.5左右，屬于同型發(fā)酵乳酸菌。此菌與其他乳酸菌的區(qū)別在于此菌的活菌數(shù)比較高，能大量的產(chǎn)酸，使水中的PH值穩(wěn)定不升高，而且其產(chǎn)出的酸性物質(zhì)能降解重金屬；由于此菌是厭氧細(xì)菌(兼性好氧)，在繁殖過程中能產(chǎn)出特有的乳酸桿菌素，乳酸桿菌素是一種生物型的防腐劑。在養(yǎng)殖中后期，由于動物的糞便和殘餌料增加，會下沉到池塘的底部，并且腐爛，滋生很多病菌，生成大量的氨氮和亞硝酸鹽，使底部偷死現(xiàn)象嚴(yán)重。如果長期使用植物乳酸桿菌，就能很好的抑制底部糞便和殘餌料的腐爛，也就降低了氨氮和亞硝酸鹽的增加，大量減少了化工降解素的用量，使養(yǎng)殖成本降低。

植物乳桿菌具有很多的保健作用，如下：①有一定的免疫調(diào)節(jié)作用；②對致病菌有抑制作用；③降低血清膽固醇含量和預(yù)防心血管疾病；④維持腸道內(nèi)菌群平衡；⑤促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)吸收；⑥緩解乳糖不耐癥；⑦抑制腫瘤細(xì)胞的形成等。然而，普遍認(rèn)為植物乳桿菌很難在牛乳中培養(yǎng)，幾乎沒有生長。

本發(fā)明旨在提供一種植物乳桿菌增殖劑，其能有效刺激植物乳桿菌的生長，尤其是在牛乳中的生長。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種植物乳桿菌增殖劑，其能有效刺激植物乳桿菌的生長，尤其是在牛乳中的生長。

江南大學(xué)楊瑞金教授等人發(fā)現(xiàn)一種具有抗血栓功能的枯草芽孢桿菌(B.subtilissp)，nk1，該菌株保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏編號為CGMCC 18057。該菌株的已知功能為可以發(fā)酵牛乳產(chǎn)生納豆激酶，制作一種具有抗血栓功能的發(fā)酵凝乳飲品。本發(fā)明所用枯草芽孢桿菌CGMCC 18057來自江南大學(xué)食品學(xué)院。

本發(fā)明團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌CGMCC 18057的大豆發(fā)酵上清液具有顯著的刺激植物乳桿菌增殖的能力。

本發(fā)明所需要解決的技術(shù)問題可以通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)。

一種植物乳桿菌增殖劑，其為：

枯草芽孢桿菌CGMCC 18057發(fā)酵上清液。

作為優(yōu)選，所述發(fā)酵上清液為在含有大豆成分的培養(yǎng)基中發(fā)酵獲得的。

作為進(jìn)一步優(yōu)選，所述發(fā)酵上清液的制備方法為：

(1)活化菌種：

取一環(huán)枯草芽孢桿菌CGMCC 18057接種到LB固體培養(yǎng)基中劃線，37℃需氧培養(yǎng)24h。挑取平板中長勢較好的單菌落接種至LB液體培養(yǎng)基中活化，最后調(diào)節(jié)濃度成10⁸cfu/ml枯草芽孢桿菌種子液。

(2)按照體積百分比為3％的接種量，將種子液接種于發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵，培養(yǎng)溫度為25～30℃，搖床轉(zhuǎn)速為150～200rpm/min，培養(yǎng)48-62h，獲得純培養(yǎng)物；

所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為：

1L蒸餾水+20g葡萄糖+15g大豆粉+5g氯化鈉+0.5g牛肉膏+20g瓊脂，pH7.0。

(3)將步驟(2)所得純培養(yǎng)物于轉(zhuǎn)速1200rpm，溫度4℃條件下離心15min，取上清液進(jìn)行無菌過濾，所述過濾膜孔徑為0.22μm，既得。