[發(fā)明專利]一種檢測hsa_circ_0065793的引物對及其應(yīng)用和試劑盒

在審

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• 申請日: 2019-12-31
• 公開（公告）號: CN111088356A
• 公開（公告）日: 2020-05-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 蘇莉;楊佳磊;吳旭龍;古聯(lián);朱路路;郭曉婧;黃焦;李敏華;趙心怡;陳杏梅
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/113
• 代理公司: 北京匯捷知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11531
• 代理人: 李宏偉

本發(fā)明涉及一種檢測hsa_circ_0065793的引物對，所述引物對包括上游引物和下游引物，上游引物序列如SEQ ID NO:1所示；下游引物序列如SEQ ID NO:2所示。本發(fā)明所提供的引物對可用于制備定性或定量檢測hsa_circ_0065793試劑盒。本發(fā)明所提供的SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的引物對能特異性擴增hsa_circ_0065793目的基因，且重復(fù)性良好。檢測速度快，特異性強，靈敏度高，穩(wěn)定可靠。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物分子學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種檢測hsa_circ_0065793的引物對及其應(yīng)用和試劑盒。

背景技術(shù)

非編碼RNA(Non-coding RNA)是一種不編碼蛋白質(zhì)的RNA，大量研究數(shù)據(jù)表明，高等生物多達一半以上的DNA轉(zhuǎn)錄為RNA，其中絕大多數(shù)為ncRNA。ncRNA在生物發(fā)育的過程中，可能有著不亞于蛋白質(zhì)的重要作用。但是，今天對整個ncRNA的世界卻了解甚少，主要任務(wù)是發(fā)現(xiàn)更多的ncRNA及其生物功能。因此，要徹底弄清ncRNA的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，將是揭示生命奧秘的最終突破。

環(huán)狀RNA(circRNA)是一類特殊的非編碼RNA分子，并且不易降解的RNA分子。環(huán)狀RNA與已知的線狀RNA不同，形成一個共價閉合的連續(xù)循環(huán)。雖然第一個circRNA早在40多年前就被發(fā)現(xiàn)的，但是人們對它的大規(guī)模研究卻是近十幾年的事情。在環(huán)狀RNA中，RNA分子的3'和5'末端通常是連接在一起的。這種特性賦予了環(huán)狀RNA許多特性，其中許多特性是最近才被識別出來的。許多環(huán)狀RNA來源于蛋白質(zhì)編碼基因，但是細胞中產(chǎn)生的環(huán)狀RNA還沒有被證明可以編碼蛋白質(zhì)。因此它們被歸類為非編碼RNA。最近，一些環(huán)狀RNA顯示出了作為基因調(diào)節(jié)器的潛力。像許多其他非編碼亞型一樣，大多數(shù)環(huán)狀RNA的生物學(xué)功能尚不清楚。由于環(huán)狀RNA沒有5'或3'端，它們對核外酶介導(dǎo)的降解具有抵抗性，并且可能比細胞中的大多數(shù)線性RNA更穩(wěn)定。

hsa_circ_0065793廣泛存在于小腦、枕葉、頂葉等組織中，，hsa_circ_0065793可能存在競爭性內(nèi)源RNA(ceRNA)作用。通過生物信息學(xué)分析，篩選出了miRNAs和mRNAs，把mRNAs進行通路富集找到了與乳腺癌相關(guān)的circRNA-miRNA-PI3K-AKT信號通路，因此，hsa_circ_0065793在研究乳腺癌中的意義重大。

對于非編碼RNA的鑒定，目前往往通過構(gòu)建非編碼RNA的cDNA文庫，運用比較傳統(tǒng)的克隆測序鑒定非編碼RNA，但這種方法工作量很大，且對低豐度的非編碼RNA檢測效率較差。隨著測序技術(shù)的發(fā)展，得到非編碼RNA的cDNA文庫以后，不用克隆就可以直接測序，檢測到大量低豐度的非編碼RNA，但是對儀器要求較高，成本也很高。所以為了能夠快速且廉價的檢測人體中的hsa_circ_0065793的表達水平，需要找到一種能特異性好的識別hsa_circ_0065793的引物，實現(xiàn)快速，簡單，廉價的檢測方法或檢測試劑盒。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種靈敏度高、特異性好的檢測hsa_circ_0065793的引物，并提供所述引物對在制備定性或定量檢測hsa_circ_0065793試劑盒的應(yīng)用，以及提供一種檢測hsa_circ_0065793的試劑盒。

為達到上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

1.一種檢測hsa_circ_0065793的引物對，所述引物對包括上游引物和下游引物，上游引物序列如SEQ ID NO:1所示；下游引物序列如SEQ ID NO:2所示。

2.包含SEQ ID NO:1所示上游引物序列，和SEQ ID NO:2所示下游引物序列的引物對在制備檢測hsa_circ_0065793試劑盒中的應(yīng)用。

進一步所述的應(yīng)用，所述檢測為定性檢測或定量檢測。