[發明專利]一種基于聚吡咯/還原氧化石墨烯水凝膠/氣凝膠合成法構建的血液分離膜

有效

• 申請號: 201911415521.2
• 申請日: 2019-12-31
• 公開（公告）號: CN111249924B
• 公開（公告）日: 2022-03-04
• 發明（設計）人: 周家華;王立山
• 申請（專利權）人: 東南大學
• 主分類號: B01D71/62
• 分類號: B01D71/62;B01D69/02;C01B32/198;C12N5/09
• 代理公司: 南京眾聯專利代理有限公司 32206
• 代理人: 呂書桁

本發明公開了一種基于聚吡咯/還原氧化石墨烯水凝膠/氣凝膠合成法構建的血液分離膜，所述血液分離膜應用于CTC的分離。所述的基于聚吡咯/還原氧化石墨烯水凝膠/氣凝膠合成法構建的血液分離膜的合成方法，通過水浴法合成聚吡咯/還原氧化石墨烯水凝膠；合成步驟如下：通過改良的Hummer方法合成氧化石墨烯，超聲處理；將NapTS和吡咯單體添加到步驟1的氧化石墨烯溶液中；將步驟2得到的混合物攪拌，然后進行靜水浴，得到PGH；將獲得的PGH冷凍干燥，獲得相應的氣凝膠，對應的氣凝膠為血液分離膜。

技術領域

本發明涉及血液分離膜技術領域，具體為一種基于聚吡咯/還原氧化石墨烯水凝膠/氣凝膠 合成法構建的血液分離膜。

背景技術

胰腺癌是第四大癌癥相關的主要死亡原因，在當前的診斷和治療條件下胰腺癌患者總體 的5年生存率僅6％。盡管對無淋巴結侵犯的胰腺癌患者行外科手術切除可使其5年生存率提 高至20％-25％，但是85％的患者都已經發展為手術不可切除的疾病。而對于晚期癌癥患者行 姑息性治療以及腫瘤降期的新輔助療法，為了獲得胰腺腫塊的組織，都依靠于侵入性活檢技 術。此外，雖然有研究表明新輔助療法可能提高胰腺癌患者的手術切除率以及生存率，但是 目前還沒有Ⅲ期臨床試驗的確切證據證明新輔助療法的效果或可能存在的標準化治療方案。 胰腺囊性腫瘤和粘液性腫瘤有惡變的風險，由于缺乏特異性診斷手段，在一部分的患者中它 們掩飾伴隨發生的惡性腫瘤。惡性的胰腺神經內分泌腫瘤也可能因為延誤診斷試劑，治愈率 低至30％。因此，當前迫切地需要對局部晚期的胰腺惡性病變和轉移擴散的生物學途徑進行 深入的了解。

鑒定腫瘤細胞中的特異性基因靶點，是研發更加有效的治療藥物必要條件，并且有助于 依據患者個體特征調整治療方案。多項研究已經證明腫瘤細胞存在于多種惡性腫瘤患者的外 周血中。循環腫瘤細胞(Circulating Tumor Cells,CTC)是一類脫離原發腫瘤并進入循環血的細 胞，原發的腫瘤細胞必需要能夠抵抗細胞間粘附破壞引起的凋亡，并穿透內皮細胞層進入外 周循環中，因此CTC的發生可能為腫瘤侵襲的遺傳學基礎提供關鍵的見解。而且，這些CTC 細胞在血流中的出現相比可檢測的遠處轉移發生更早，因此推測CTC也可能參與到轉移擴散 的途徑中。這種發生于在晚期疾病之前的早期表現，表明分離出CTC至少具有以下幾種潛在 的應用前景：1、通過影像或活檢結果提示為良性病變的腫塊中，一旦發現CTC就能夠推斷 出之前未被檢測出的惡性腫瘤；2、為了診斷性目的通過基本的抽血方法從患者外周血中收集 來源于腫瘤中的細胞，可能會代替一部分腫瘤不適合行的常規活檢技術；3、在疾病自然發展 過程中當還處于可治愈期間，同樣地也以避免致病性的侵入性活檢。此外，如果CTC確實在 血源性轉移進程中起關鍵的作用，那么進一步深入研究這些細胞的遺傳學特征，將能夠通過 局部調控治療腫瘤的擴散并提高治愈率。

迄今為止，分離CTC的主要挑戰是CTC與循環血細胞相比其數量極其稀少，在10ml的全血中可能僅存在1-2個CTC，相比于同樣體積的血液中存在10⁷的白細胞和超過10¹⁰的紅細胞。利用上皮標記物從血細胞中分離出CTC，這項技術受限于事實上在外周循環中存在非腫瘤的上皮細胞，這種現象甚至已經在健康受試者體內得到證實。而且上皮標記物通常在 腫瘤細胞發生上皮間質轉化過程中丟失，這對于腫瘤細胞發生侵襲和血液散播十分關鍵。因 此理想的CTC分離方法將能夠特定地選擇出這些數量極為稀少的腫瘤細胞，而沒有受到依據 上皮細胞蛋白表達產生假陽性和假陰性的影響。此外，這種技術必需能夠過濾掉血液中其他 細胞產生的干擾，并且在可分析的條件下能夠保護CTC。新型(Westford,MA)過 濾裝置，根據細胞大小介導的分揀原理，已經能夠從胃腸和其他惡性腫瘤患者的外周血中分 離出CTC。目前以細胞大小為基礎的CTC分離方法已經證明適用于很多上皮的和非上皮的腫 瘤中，包括乳腺、肺、結腸、肝、前列腺、黑色素瘤以及胰腺腺癌。

深入地理解影響到胰腺腫瘤的診斷、化療靶點的確定以及潛在轉移機制。CTC中的基因 靶點與切除的原發腫瘤相比具有相似的遺傳信息，從外周血樣本中分離的這些CTC可能能夠 代表一種新的檢測胰腺腫塊幾乎無創性的方法。