[發明專利]棕櫚酰三肽-5的液相合成方法

有效

• 申請號: 201911412657.8
• 申請日: 2019-12-31
• 公開（公告）號: CN111004306B
• 公開（公告）日: 2020-09-25
• 發明（設計）人: 于更立;李江濤;林志樂;卞發財;司呈元;劉聰
• 申請（專利權）人: 山東濟肽生物科技有限公司
• 主分類號: C07K5/09
• 分類號: C07K5/09;C07K1/06;C07K1/02;C07K1/30
• 代理公司: 青島發思特專利商標代理有限公司 37212
• 代理人: 盧登濤

本發明公開了一種棕櫚酰三肽?5的液相合成方法，屬于生物醫藥制備方法技術領域，包括以下步驟：Pal?Lys(Boc)?OH的合成，Pal?Lys(Boc)?OSu的合成，Val?NCA的合成，H?Val?Lys(Boc)?OH的合成，Pal?Lys(Boc)Val?Lys(Boc)?OH的合成，棕櫚酰三肽?5的合成，產品真空干燥后得到白色固體。本發明棕櫚酰三肽?5的液相合成方法，最終產品可以通過結晶的方法進行純化，成功避免了固相合成最后需要液相純化，降低了生產成本，增加了批量生產能力。

技術領域

本發明屬于生物醫藥制備方法技術領域，具體涉及一種棕櫚酰三肽-5的液相合成方法。

背景技術

抗衰老棕櫚酰三肽-5(序列：Pal-KVK)是DSM的產品，商標名SYN-COLL，是一種棕櫚酰三肽，它的序列與人體機體自身機制相似，通過激活潛在的無生物活性的TGF-β(組織生長因子)產生膠原蛋白。因此能夠作為皮膚膠原蛋白缺失的補充從而使肌膚更加年輕，可以減少任何類型的皺紋。臨床試驗顯示，Pal-KVK與安慰劑和參比物質比較，含Pal-KVK護膚品顯著減少皮膚松弛，減少和改變年齡紋。與10ppm棕櫚酰五肽-4相比，明顯具有更高的活性。該成分被我國2015年已使用化妝品原料名稱目錄收錄，可以合法添加。

該產品的合成未見文獻報道，它的合成一直是采取固相合成方法，樹脂切割后用制備液相純化得到，存在成本高，對環境的污染大。

發明內容

本發明的目的是提供一種棕櫚酰三肽-5的液相合成方法，以解決上述問題。

為了實現上述目的，本發明采用的技術方案為：

本發明棕櫚酰三肽-5的液相合成方法，包括以下步驟：

1)Pal-Lys(Boc)-OH的合成：

在反應裝置中，攪拌下依次加入水，NE-(叔丁氧基羰基)-L-賴氨酸，用30％的氫氧化鈉溶液調pH＝10,邊滴加棕櫚酰氯邊用30％的氫氧化鈉溶液控制pH＝10,加完控制pH＝10，室溫反應，調pH＝2析出大量固體，過濾，固體真空干燥；

2)Pal-Lys(Boc)-OSu的合成：

在反應裝置中，攪拌下依次加入四氫呋喃，步驟1)所得Pal-Lys(Boc)-OH，降溫至0-5℃，加入N-羥基琥珀酰亞胺，攪拌10min，分批加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽，室溫反應，過濾，減壓濃縮得到白色固體，濾餅用異丙醇打漿后過濾，固體真空干燥；

3)Val-NCA的合成：

在反應裝置中，攪拌下依次加入四氫呋喃，纈氨酸和三光氣，50℃反應2h，減壓濃縮，濃縮后加石油醚打漿后過濾，固體真空干燥；

4)H-Val-Lys(Boc)-OH的合成：

在反應裝置中，攪拌下依次加入水、四氫呋喃、氫氧化鈉、NE-(叔丁氧基羰基)-L-賴氨酸,冷阱降溫，邊加步驟3)所得Val-NCA，邊用30％的氫氧化鈉溶液控制pH＝11，滴加完后升溫反應1-2h，調pH＝2，用正丁醇萃取，鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，減壓濃縮得到油狀物；

5)Pal-Lys(Boc)Val-Lys(Boc)-OH的合成：

在反應裝置中，加入水、四氫呋喃、步驟2)所得Pal-Lys-OSu和步驟4)所得H-Val-Lys(Boc)-OH，用30％的氫氧化鈉溶液調pH＝8.5,室溫反應2小時，減壓濃縮，、調pH＝2，用乙酸乙酯萃取，鹽水洗滌，減壓濃縮得到白色固體；

6)棕櫚酰三肽-5的合成：