[發明專利]一種促進生物發酵產纖維素酶的方法

有效

• 申請號: 201911402446.6
• 申請日: 2019-12-31
• 公開（公告）號: CN113122522B
• 公開（公告）日: 2022-05-03
• 發明（設計）人: 高慧鵬;張全;關浩;王蒙;彭紹忠
• 申請（專利權）人: 中國石油化工股份有限公司;中國石油化工股份有限公司大連石油化工研究院
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;C12P7/16;C12R1/145;C12R1/885
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種促進生物發酵產纖維素酶的方法，以保藏編號為CGMCC No. 9124的拜氏梭菌XH0906接種至丁醇發酵培養基中，發酵生產丁醇，所述丁醇發酵培養基中的碳源為50-150g/L的葡萄糖或相當含糖量的木質纖維素糖化液，還包括蛋白胨5-10g/L、牛肉膏4-8g/L、硫酸銨0.5-1.0g/L、硫酸鐵0.05-0.2g/L、硫酸鎂0.1-0.5g/L；將發酵產物除去丁醇后，先加入乙醇，收集沉淀，向沉淀中加入硫酸或鹽酸酸解，酸解產物加入至纖維素酶發酵菌種的培養基中，酸解產物向纖維素酶發酵菌種的培養基的添加比例按酸解前固形物沉淀的質量計為20-100g固體/L培養基，之后接種纖維素酶發酵菌種，促進纖維素酶的發酵生產，纖維素酶發酵菌種為保藏編號是CGMCC No.2736的綠色木霉（Trichoderma viride）F4。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，拜氏梭菌XH0906發酵產丁醇的發酵溫度為30-38℃，控制pH為5.0-8.0，發酵時間為72-120h。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，發酵產物除去丁醇的方法是蒸餾法。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，發酵產物除去丁醇后按3-8倍體積加入乙醇，混勻反應后，離心或過濾收集沉淀，40-60℃干燥2-4h。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述硫酸或鹽酸的質量濃度為0.5%-5%。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，酸解處理后還需經過滅菌處理，滅菌處理后，調節pH至5.5-7.0。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述纖維素酶發酵菌種的培養基還包括以下組分：麥麩10-60g/L，磷酸二氫鉀0.1-10g/L，硫酸銨1-10g/L，氯化鈣 0.01-3g/L，硫酸鎂0.01-3g/L，ZnSO₄·7H₂O 0.01-50mg/L，MnSO₄·4H₂O 0.01-20mg/mL，CoCl₂ 0.01-50mg/L和FeSO₄ 0.1-20mg/L。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，纖維素酶發酵采用批次發酵，菌種的接種體積比為5%-15%，發酵溫度為23-35℃，pH為4.0-7.0，發酵時間為48-168h。