[發明專利]一種固態發酵生產乳酸菌素的方法

在審

• 申請號: 201911398016.1
• 申請日: 2019-12-30
• 公開（公告）號: CN111118092A
• 公開（公告）日: 2020-05-08
• 發明（設計）人: 朱校適;季春源;孫中超;高小創;王利杰;郭蓓蓓;劉錦芳
• 申請（專利權）人: 江蘇鹽城源耀生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/00
• 分類號: C12P21/00;C07K14/335;C12R1/23
• 代理公司: 上海申新律師事務所 31272
• 代理人: 郎祺

1.一種固態發酵生產乳酸菌素的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟一，菌株的獲取和篩選；

步驟二，菌株的三級擴培：一級發酵罐接入千億級菌粉，發酵周期為14-18h；二級發酵罐接種量2-5％，發酵周期為9-13h；三級發酵罐接種量2-5％，發酵周期為7.5-11h；

步驟三，固態發酵物料原料的處理：碳源類物料原料經除雜、稱量后倒入預粉碎機(3)中進行粉碎至粒徑為30-50目，然后進入糖化罐(4)中進行糊化和糖化成為糖化液；氮源類物料原料經除雜、稱量、混合后倒入預粉碎機(3)進行粉碎至粒徑為30-50目，然后進入滅菌調制機(5)中在整齊的加熱下升溫至90-100℃，保溫15-30min，進行滅菌，在攤涼機(6)上進行降溫；

步驟四，菌種液的調制：在菌種調制罐(2)中將步驟二獲得的所述菌株、步驟三獲得的所述糖化液、下架奶粉、酶和水進行混合均勻形成菌種調制液，混合液溫度調至28-40℃范圍內；

步驟五，接種：在接種機(7)內，將步驟三獲得的所述菌種調制液和步驟三中處理后的所述氮源類物料混合均勻，加入蛋白酶、淀粉酶、果膠酶及植酸酶；其中，接種量以固態培養基計為10-20％，混合后的物料溫度為28-32℃，接種后水的含量為68-72％；

步驟六，發酵：將步驟五混合后的含菌種的物料放到發酵容器(8)內，將培養基表面抹平，將塑料薄膜附在表面；并將發酵容器(8)放置在發酵房(9)中，控制所述發酵房(9)的溫度使所述物料的溫度為33-39℃進行發酵；

步驟七，干燥：結束發酵后，在閃蒸干燥機(11)內干燥，通過回料系統(12)回流的方式將物料中小分子成分進行稀釋，再通過進料調制絞龍(10)將回流的所述物料混合后再進入所述蒸干燥機(11)內干燥；

步驟八，粉碎和打包：干燥后在粉碎機(13)中粉碎后冷卻過篩，再經粉碎機粉碎，經冷卻，然后用打包機(14)進行打包。

2.根據權利要求1所述的一種固態發酵生產乳酸菌素的方法，其特征在于步驟一中所述菌株為耐受高溫、耐受胰蛋白酶的乳酸菌素高產菌株為嗜酸乳桿菌YY13002，現已被中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，其分類命名為嗜酸乳桿菌lactobacillus acidophilus，其保藏編號為CGMCC No.8043。

3.根據權利要求1所述的一種固態發酵生產乳酸菌素的方法，其特征在于，步驟二中所述三級擴培的發酵條件為37℃、pH 3.8、厭氧發酵；接種后，先進行靜止發酵4-6h，之后以80-120rpm的速度攪拌。

4.根據權利要求1所述的一種固態發酵生產乳酸菌素的方法，其特征在于，進一步地，步驟二中所述發酵罐中的培養基為液體培養基，其包含的組分及其百分比為葡萄糖0.8-1.5％、磷酸二氫鉀1-4‰和大豆3-5％。

5.根據權利要求4所述的一種固態發酵生產乳酸菌素的方法，其特征在于，所述液體培養基的制備方法為：先讓大豆進行萌發，在大豆芽長度為1cm-3cm時，將豆芽進行粉碎，均質，第一次加水進行調制，溫度控制在35-50℃，緩慢攪拌4-6h；然后加入葡萄糖、磷酸氫二鉀，第二次加水調制，然后升溫滅菌。

6.根據權利要求5所述的一種固態發酵生產乳酸菌素的方法，其特征在于，第一次加水至培養基中固含物量為10％-15％；第二次加水至培養基中固含物量為5％。

7.根據權利要求1所述的一種固態發酵生產乳酸菌素的方法，其特征在于，步驟三中所述固態發酵物料原料包括豆粕、玉米、碎米和下架奶粉。

8.根據權利要求1所述的一種固態發酵生產乳酸菌素的方法，其特征在于，步驟四所述酶包括蛋白酶、淀粉酶、果膠酶和植酸酶。

9.根據權利要求1所述的一種固態發酵生產乳酸菌素的方法，其特征在于，成品水分含量按10％計，步驟六發酵至PH低于4.0且總酸高于9％。

10.根據權利要求1所述的一種固態發酵生產乳酸菌素的方法，其特征在于，步驟七中的干燥條件為溫度≤75℃，時間為5～10min。