[發(fā)明專利]一種鑒別奶營養(yǎng)品質的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911397797.2
• 申請日: 2019-12-30
• 公開（公告）號: CN111077262B
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發(fā)明（設計）人: 陳剛;蘇美丞;賈曼;譚冬飛;朱丹;王少雷;張清陽;張霞
• 申請（專利權）人: 中國農業(yè)科學院農業(yè)質量標準與檢測技術研究所
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 盛大文

1.一種鑒別奶品品質的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1），對奶樣進行色氨酸代謝物的提取，得提取物；所述色氨酸代謝物為5-羥色氨酸、吲哚-3-乙胺、色胺、3-羥基鄰氨基苯甲酸、煙酸、黃尿酸、犬尿氨酸、犬尿酸、吲哚甲醛和吲哚乙酸；

步驟2），對步驟1）中所述提取物進行色譜分離-質譜掃描，對所述奶樣中的色氨酸代謝物進行定量分析，測定定量限和回收率；

步驟3)，根據步驟2）中所述奶樣中色氨酸代謝物的含量數據，對所述奶樣品進行分析；

步驟1）中，所述奶樣包括巴氏殺菌奶、超高溫滅菌奶、復原乳樣品和酸奶樣品；

步驟1）中，向奶樣中加入甲酸乙腈，所述甲酸乙腈為甲酸和乙腈的混合溶液，甲酸和乙腈的體積比為3~8:97~92；

步驟1）中，向奶樣中加入甲酸乙腈，渦旋；再加入萃取鹽包，渦旋、離心，轉移上層溶液，再加入凈化試劑，渦旋、離心，取上層溶液用氮氣吹干；加入復溶液進行水浴超聲，渦旋混勻重新溶解，離心取上層溶液過膜，供下一步檢測；所述萃取鹽包為硫酸鈉和氯化鈉；所述凈化試劑為硫酸鈉和C18；

步驟2）中，所述色譜分離的條件為：采用的流動相A為含0.1%甲酸的水溶液，流動相B為含0.1%甲酸的甲醇溶液，采用梯度洗脫；

步驟2）中，洗脫梯度為:

步驟2）中，質譜的條件為：多反應檢測（MRM）正離子模式，氣簾氣（CUR）35 psi，噴撞氣（CAD）10 psi，離子化電壓（IS）5500 V，溫度（TEM）500℃；噴霧器（GS1）50 psi；輔助加熱器（GS2）50 psi。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述復原乳樣品為全脂奶粉，按照蛋白質含量為3.0 g/100 mL 配制而得；和/或，所述酸奶樣品經過1:1稀釋后再進行后續(xù)處理。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，取5~10份奶樣，每份奶樣體積為5~10ml；所述奶樣、所述甲酸乙腈和所述復溶液的體積比為（5~10）:（5~15）:（0.5~3）。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述奶樣、所述甲酸乙腈和所述復溶液的體積比為5:10:1。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述萃取鹽包為2~8g硫酸鈉和0.5~3g氯化鈉。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述凈化試劑為200~1500mg硫酸鈉和50~300mg C18。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述萃取鹽包為4g硫酸鈉和1g氯化鈉；所述凈化試劑為900mg硫酸鈉和150mg C18。

8.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，步驟1）中，所述甲酸乙腈為甲酸和乙腈的混合溶液，甲酸和乙腈的體積比為5:95；和/或，所述復溶液為10%的乙腈水溶液；和/或，離心條件為8000~10000 rpm離心8~10 min；和/或，水浴超聲的條件為20~30℃水浴超聲8~10min。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2）中，所述色譜分離-質譜掃描包括一級掃描和二級離子碎片掃描。

10.根據權利要求1-9任一項所述的方法，其特征在于，步驟3)中，根據所述奶樣中各代謝物的含量數據，對所述奶樣進行方差分析和偏最小二乘判別分析，確定出不同奶樣中含量存在差異的化合物。