[發(fā)明專利]一種同時測定土壤中不同類型硝化潛勢的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911396579.7
• 申請日: 2019-12-30
• 公開（公告）號: CN110988308B
• 公開（公告）日: 2022-08-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 金雪蓮;姚槐應(yīng)
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院城市環(huán)境研究所;中國科學(xué)院寧波城市環(huán)境觀測研究站
• 主分類號: G01N33/24
• 分類號: G01N33/24
• 代理公司: 浙江中桓聯(lián)合知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33255
• 代理人: 陳道升

本發(fā)明屬于土壤硝化技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種可同時測定土壤中不同類型硝化潛勢的方法，包括以下步驟：S1、將土壤樣品置于反應(yīng)器中并加入硫酸銨，密封反應(yīng)器，在黑暗環(huán)境下恒溫震蕩，分別于第2h、4h、15h、22h、24h吸取土壤懸浮液，過濾離心，測定硝態(tài)氮濃度，以培養(yǎng)時間為橫坐標(biāo)，以硝態(tài)氮濃度為縱坐標(biāo)，求出斜率，即為土壤硝化潛勢；S2、將土壤樣品置于反應(yīng)器中并加入硫酸銨，密封反應(yīng)器，加入乙炔氣體，在黑暗環(huán)境下恒溫震蕩，其它步驟同上，測定加入乙炔后的土壤硝化潛勢；S3、將土壤樣品置于反應(yīng)器中并加入硫酸銨，密封反應(yīng)器，加入辛炔氣體，在黑暗環(huán)境下恒溫震蕩，其它步驟同上，測定加入辛炔后的土壤硝化潛勢。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于土壤硝化技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種可同時測定土壤中不同類型硝化潛勢的方法。

背景技術(shù)

硝化作用，即將氨氧化為硝酸鹽的過程，是由微生物驅(qū)動的生物地球化學(xué)過程，可分為異養(yǎng)硝化和自養(yǎng)硝化兩種類型，其中自養(yǎng)硝化是眾多生物界硝化作用的主導(dǎo)。傳統(tǒng)的自養(yǎng)硝化過程分為兩步，第一步是由氨氧化微生物包括氨氧化古菌(AOA)和氨氧化細(xì)菌(AOB)完成的氨氧化作用，將NH₄⁺氧化成NO₂^-；第二步是由亞硝酸鹽氧化細(xì)菌(NOB)完成的亞硝酸鹽氧化，將NO₂^-氧化成NO₃^-。土壤硝化作用是自然界中連接氧化態(tài)和還原態(tài)無機氮庫的重要環(huán)節(jié)，在維持全球氮平衡中起著關(guān)鍵作用；且關(guān)于因硝化作用引起的環(huán)境污染問題，亦日益受到研究者們的重視，因此測定硝化作用有重要意義。

硝化潛勢是表征土壤硝化作用強度的重要指標(biāo)，現(xiàn)階段測定土壤硝化潛勢多采用土壤培養(yǎng)法，如張慧等(張慧,袁紅朝,朱亦君,etal.不同利用方式對紅壤坡地微生物多樣性和硝化勢的影響[J].生態(tài)學(xué)雜志,2011,30(06):1169-1176)一文中所采用的土壤培養(yǎng)法：稱取新鮮土壤樣品(相當(dāng)于300g烘干土重)2份，以100mgN·kg^－1烘干土重的比例加入(NH₄)₂SO₄，調(diào)節(jié)土壤含水量至田間持水量的60％，裝于500ml燒杯中，用錫箔紙封口，于25℃避光培養(yǎng)3周，每周測定土壤NO₃^－-N含量(其間稱重并定時補充失去的水分)，以培養(yǎng)時間為橫坐標(biāo)，以NO₃^－-N含量為縱坐標(biāo)，求出斜率，即土壤硝化勢(mg·kg^－1·d^－1)。

現(xiàn)階段的土壤培養(yǎng)法僅能得到土壤整體所具有的硝化潛勢，不能區(qū)分測定異養(yǎng)硝化、自養(yǎng)硝化的硝化潛勢，以及自養(yǎng)硝化中氨氧化古菌(AOA)和氨氧化細(xì)菌(AOB)的硝化潛勢，具有一定局限性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種測定土壤硝化潛勢的方法，該方法可同時獲得土壤異養(yǎng)硝化和自養(yǎng)硝化的硝化潛勢，以及自養(yǎng)硝化中氨氧化古菌(AOA)和氨氧化細(xì)菌(AOB)的硝化潛勢，為土壤不同硝化作用的研究提供了便利。

本發(fā)明的上述發(fā)明目的通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)：一種同時測定土壤中不同類型硝化潛勢的方法，包括以下步驟：

S1、測定土壤整體硝化潛勢：將土壤樣品置于反應(yīng)器中并加入硫酸銨溶液，密封反應(yīng)器，在黑暗環(huán)境下于20-30℃恒溫震蕩，分別于第2h、4h、15h、22h、24h吸取土壤懸浮液，立即過濾離心，測定硝態(tài)氮濃度，以培養(yǎng)時間為橫坐標(biāo)，以硝態(tài)氮濃度為縱坐標(biāo)，求出斜率，即為土壤硝化潛勢；

S2、測定加入乙炔后的硝化潛勢：將土壤樣品置于反應(yīng)器中并加入硫酸銨溶液，密封反應(yīng)器，加入乙炔氣體，在黑暗環(huán)境下于20-30℃恒溫震蕩，其它步驟同上，測定加入乙炔后的土壤硝化潛勢；

S3、測定加入辛炔后的硝化潛勢：將土壤樣品置于反應(yīng)器中并加入硫酸銨溶液，密封反應(yīng)器，加入辛炔氣體，在黑暗環(huán)境下于20-30℃恒溫震蕩，其它步驟同上，測定加入辛炔后的土壤硝化潛勢。