[發明專利]一種無血清無DMSO細胞凍存液及其制備方法

在審

• 申請號: 201911389807.8
• 申請日: 2019-12-30
• 公開（公告）號: CN110934132A
• 公開（公告）日: 2020-03-31
• 發明（設計）人: 高寧;席其良
• 申請（專利權）人: 蘇州君欣生物科技有限公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 北京匯捷知識產權代理事務所(普通合伙) 11531
• 代理人: 李宏偉

1.一種無血清無DMSO的細胞凍存液，其組成包括：DMEM/F-12基礎培養基16.762-16.825g/L、細胞因子32-34mg/L、羥乙基淀粉0.2-0.8mg/L、維生素1-3mg/L、抗生素0.15-0.16g/L、蛋白多肽5-6mg/L、脂類1-4mg/L、細胞內外冷凍保護劑0.1-0.41g/L。

2.根據權利要求1所述的一種無血清無DMSO的細胞凍存液，其特征在于：所述的細胞因子，按質量百分含量，其組成為：胰島素99.955％、重組人表皮細胞生長因子0.03％、重組人堿性成纖維細胞生長因子0.015％。

3.根據權利要求1所述的一種無血清無DMSO的細胞凍存液，其特征在于：所述的抗生素為青霉素和鏈霉素，所述的青霉素含量為0.06g/L，所述的鏈霉素含量為0.1g/L。

4.根據權利要求1所述的一種無血清無DMSO的細胞凍存液，其特征在于：所述的維生素為維生素C。

5.根據權利要求1所述的一種無血清無DMSO的細胞凍存液，其特征在于：所述的蛋白多肽為白蛋白和轉鐵蛋白，所述的白蛋白的加入量為0.1-0.8μg/L，所述的轉鐵蛋白的加入量為5.1-5.2mg/L。

6.根據權利要求1所述的一種無血清無DMSO的細胞凍存液，其特征在于：所述的脂類為乙醇胺和亞油酸，所述的乙醇胺加入量為1-3mg/L，所述的亞油酸的加入量為2-6μg/L。

7.根據權利要求1所述的一種無血清無DMSO的細胞凍存液，其特征在于：所述的細胞內外的冷凍保護劑為海藻糖、聚乙烯吡咯烷酮和甲基纖維素；所述的海藻糖的加入量為0.034-0.102g/L，所述的聚乙烯吡咯烷酮加入量為0.2-0.8mg/L，所述的甲基纖維素加入量為0.1-0.3g/L。

8.根據權利要求1-7任一項所述的一種無血清無DMSO的細胞凍存液，其特征在于：所述的無血清無DMSO細胞凍存液，其組分含量為：無水氯化鈣110-116.6mg/L，L-亮氨酸55-59.05mg/L，亞油酸0.03-0.042mg/L，五水硫酸銅0.0012-0.0013mg/L，L-賴氨酸鹽酸鹽90-91.25mg/L，硫辛酸0.08-0.105mg/L，九水硝酸鐵0.02-0.05mg/L，L-蛋氨酸15.00-17.24mg/L，酚紅6.5-8.1mg/L，七水硫酸亞鐵0.35-0.417mg/L，L-苯丙氨酸33-35.48mg/L，1，4-丁二胺二鹽酸鹽0.07-0.081mg/L，氯化鉀280-311.8mg/L，L-絲氨酸24-26.25mg/L，丙酮酸鈉53-55mg/L，氯化鎂26.2-28.64mg/L，蘇氨酸50.3-53.45mg/L，維生素H 0.0035-0.005mg/L，無水硫酸鎂47-48.84mg/L，丙氨酸4.45-4.50mg/L，泛酸鈣2.24-3.2mg/L，氯化鈉6500-6999.5mg/L，L-天門冬酰胺7.5-8.3mg/L，氯化膽堿7.88-8.98mg/L，無水磷酸二氫鈉51.2-54.35mg/L，天門冬氨酸5.59-6.65mg/L，葉酸2.65-3.25mg/L，磷酸氫二鈉69.5-71.02mg/L，L-半胱氨酸鹽酸鹽16.88-17.56mg/L，I-肌醇11.3-12.6mg/L，七水硫酸鋅0.432-0.551mg/L，谷氨酸7.35-8.06mg/L，煙酰胺2.02-2.45mg/L，L-精氨酸鹽酸鹽145-147.5mg/L，L-脯氨酸15.9-17.25mg/L，鹽酸吡哆醛1-2mg/L，L-胱氨酸鹽酸鹽31.29-32.85mg/L，L-色氨酸9.02-9.57mg/L，鹽酸吡哆醇0.031-0.036mg/L，L-谷氨酰胺365-378mg/L，L-酪氨酸38.4-39.1mg/L，核黃素0.219-0.233mg/L，甘氨酸18.75-19.11mg/L，L-頡氨酸52.85-53.31mg/L，鹽酸硫胺2.17-2.22mg/L，L-組氨酸鹽酸鹽31.48-32.10mg/L，D-葡萄糖3151-3230mg/L，胸苷0.365-0.445mg/L，L-異亮氨酸54.47-55.2mg/L，次黃嘌呤1.55-2.03mg/L，維生素B120.63-0.68mg/L，胰島素8-12mg/L，轉鐵蛋白5-6mg/L，乙醇胺1-3mg/L，亞油酸2-6μg/L，白蛋白0.1-0.8μg/L，重組人表皮細胞生長因子0.1-0.5μg/L，氫化可的松0.3-0.4mg/L，青霉素0.06g/L，鏈霉素0.1g/L，維生素C 1-3mg/L，甜菜堿0.05-3mg/L，海藻糖0.1-0.3mM/L，甲基纖維素0.1-0.3g/L，碳酸氫鈉10-12.75mg/L，重組人堿性成纖維細胞生長因子0.1-0.2μg/L，羥乙基淀粉0.2-0.8mg/L，聚乙烯吡咯烷酮0.2-0.8mg/L。