[發明專利]一種防治小鵝瘟的口服緩釋抗體的制備方法

在審

• 申請號: 201911386821.2
• 申請日: 2019-12-29
• 公開（公告）號: CN111150843A
• 公開（公告）日: 2020-05-15
• 發明（設計）人: 陳慶忠;安同偉;李迎梅
• 申請（專利權）人: 天津赫萊恩特生物科技有限公司
• 主分類號: A61K39/42
• 分類號: A61K39/42;A61K47/12;A61K47/26;A61K47/36;A61P31/20;C07K16/08;C07K16/02
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本發明提供了一種防治小鵝瘟的口服緩釋抗體的制備方法，該口服緩釋抗體的有效組分及其體積份數比為：含小鵝瘟卵黃抗體的卵黃勻漿70?90份、抗酸劑0.1?0.2份、正辛酸0.05?0.15份、甲醛0.05?0.15份、蔗糖0.1?0.2份、海藻酸鈉0.1?0.2份。本發明中抗酸劑可以使抗體口服后仍能通過消化道和胃粘膜刺激免疫應答，保持活性；同時本發明中加入了蔗糖和海藻酸鈉，保證了口服卵黃抗體適口性和緩釋作用，提高了抗體效率持續時間。

技術領域

本發明屬于獸用生物制品技術領域，具體涉及一種防治小鵝瘟的口服緩釋抗體的制備方法。

背景技術

在非洲豬瘟和禽流感的風口下，人類生活中水禽動物源性食品備受青睞，水禽養殖量也在逐日增多，并呈集約化發展，養殖量直線上升的同時其疫病的防控也極為關鍵。長期以來水禽方面，小鵝瘟的危害最大，其為鵝細小病毒引起的雛鵝急性敗血性傳染病，發病雛鵝或雛番鴨的死亡率高達90％-100％，對養鵝業的發展影響極大，尤其是小鵝瘟不僅可以感染鵝，在一定程度上也可感染番鴨等其他禽類，因此搞好小鵝瘟的預防和治療工作尤為關鍵。目前，小鵝瘟疫病的防治主要是采用疫苗免疫及母源被動免疫，其保護期較短(僅2個月左右)，存在空窗期，同時注射免疫應激大，減食、生長受抑等嚴重，造成目前養殖者生物防控意識不強。

卵黃抗體具有性質穩定、特異性強、制備成本低、口服安全等優點在家禽、家畜傳染病的防治中已得到廣泛的應用。產品的開發也在生態農業和食品安全方面產生了良好的經濟效益和社會效益。在診斷、預防和治療人類和動物各種疾病中具有良好的應用價值。

鑒于此，二者的有效結合成為水禽養殖業的新希望。

發明內容

本發明的目的在于提供一種防治小鵝瘟的口服緩釋抗體的制備方法，該方法可以解決常規卵黃抗體注射免疫應激大而引起減食、生長受抑等弊端。

本發明另一個目的在于解決了現有技術下卵黃抗體口服活性和穩定性差，抗體效力時間短的問題，本發明中加入抗酸劑、蔗糖和海藻酸鈉后，保護了消化道酸性環境對抗體的破壞，同時實現了有效物質的緩釋，延長了抗體的效力時間。

為達到上述目的，本發明是通過以下技術方案實現的：

1、一種防治小鵝瘟的口服緩釋抗體的制備方法，其有效組分及其體積份數比為：含小鵝瘟卵黃抗體的卵黃勻漿70-90份、抗酸劑0.1-0.2份、正辛酸0.05-0.15份、甲醛0.05-0.15份、蔗糖0.1-0.2份、海藻酸鈉0.1-0.2份。

而且，所述的抗酸劑為抗酸劑為檸檬酸鹽，可以為檸檬酸鈉和檸檬酸鉀的其中一種。

2、一種防治小鵝瘟的口服緩釋抗體的制備方法，包括以下步驟：

(1)采用小鵝瘟滅活疫苗對200日齡蛋鴨進行首次免疫，用量1ml/只，首次免疫7天后進行二次免疫1ml/只，二免后14天進行再次加強免疫1ml/只，檢測小鵝瘟血清抗體效價至1:512～1:1024時收集高免蛋；

(2)取步驟(1)中所收集的高免蛋洗凈消毒，而后收集蛋黃，充分攪拌，使蛋黃呈均勻膏狀，加入與蛋黃等體積的滅菌注射水，攪拌混勻后，60～65℃保溫滅活30分鐘，得卵黃勻漿備用；

(3)向步驟(2)分離的卵黃勻漿邊攪拌邊加入濃度為0.1％的正辛酸，充分攪拌0.5～1.5小時，室溫放置2～6小時后，以4200～5500r/min的轉速離心15min，棄沉淀；用孔徑5μm和1μm的筒式濾芯過濾上清液，再經截留分子量為10kD的中空纖維超濾柱進行濃縮3～4倍后再用NaOH調整PH值為6.8～7.0，并以0.45μm和0.22μm筒式濾芯過濾除菌。

(4)取步驟(3)所述濾液，按體積比依次加入甲醛、蔗糖、抗酸劑和1％-1.5％海藻酸鈉，37℃-45℃控溫攪拌1～2h后于37℃滅活2h，定量分裝，加蓋密封，2～8℃保存，即得到所述一種防治小鵝瘟的口服緩釋抗體。