[發明專利]一種微量生物組織簡易快速研磨方法

在審

• 申請號: 201911384732.4
• 申請日: 2019-12-28
• 公開（公告）號: CN110964721A
• 公開（公告）日: 2020-04-07
• 發明（設計）人: 陳玲;付堅;王波;程在全;陳越;鐘巧芳;張敦宇;殷富有;王玲仙;余騰瓊;肖素勤;柯學;蔣聰
• 申請（專利權）人: 云南省農業科學院生物技術與種質資源研究所
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10;C07K1/14;C12N1/06
• 代理公司: 云南凌云律師事務所 53207
• 代理人: 康珉

1.一種微量生物組織簡易快速研磨方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)研磨耗材的準備；

(2)將液氮倒入冷凍紙盒，使冷凍紙盒裝滿液氮且不溢出，將需研磨的生物樣品加入已滅菌的離心管中，每個離心管內放入已滅菌的鋼珠球1～2粒，蓋上離心管蓋子，將離心管放入冷凍紙盒格子內，期間補充揮發的液氮使冷凍紙盒裝滿液氮且不溢出，加完所有樣品后，蓋好冷凍紙盒蓋子；

(3)待樣品冷凍0.5～1min后，從冷凍紙盒的一個角把液氮倒回液氮罐中，再蓋好冷凍紙盒蓋子；

(4)手動上下以每秒不低于2次的速度搖動冷凍紙盒，使樣品破碎；所述每秒不低于2次以手動連續一上一下為1次；

(5)揭開冷凍紙盒蓋子，將液氮再次倒入冷凍紙盒中，裝滿冷凍紙盒且不溢出，然后蓋上冷凍紙盒蓋子。

2.如權利要求1所述一種微量生物組織簡易快速研磨方法，其特征在于，步驟(2)中所述鋼珠球的直徑為所用離心管內徑的0.5～0.7倍。

3.如權利要求1或2所述一種微量生物組織簡易快速研磨方法，其特征在于，步驟(4)中搖動冷凍紙盒的總時間為0.5～1min。

4.如權利要求1所述一種微量生物組織簡易快速研磨方法，其特征在于，所述步驟(5)中將液氮再次倒入冷凍紙盒中后，用鑷子取出離心管，倒出鋼珠球，樣品留在離心管中，蓋上離心管蓋子，將離心管放回冷凍紙盒格子內，然后蓋上冷凍紙盒蓋子，倒出的鋼珠用清水洗凈、滅菌、干燥備用。

5.如權利要求1所述一種微量生物組織簡易快速研磨方法，其特征在于，步驟(1)中所述研磨耗材包括塑料離心管、鋼珠球、冷凍紙盒、液氮、防凍手套、鑷子。

6.根據權利要求1至5中任一權利要求所述一種微量生物組織簡易快速研磨方法，其特征在于，當研磨新鮮樣品量大于120mg或干樣大于60mg時，重復所述步驟(3)至步驟(4)1～2次。