[發(fā)明專利]一種紫色人參組織細胞的培養(yǎng)方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911384726.9
• 申請日: 2019-12-28
• 公開（公告）號: CN111088212A
• 公開（公告）日: 2020-05-01
• 發(fā)明（設計）人: 侯劍峰
• 申請（專利權(quán)）人: 士齊生物研發(fā)中心（蘇州工業(yè)園區(qū)）有限公司
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04
• 代理公司: 北京聯(lián)瑞聯(lián)豐知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 11411
• 代理人: 周超

本發(fā)明公開了一種紫色人參組織細胞的培養(yǎng)方法，包括如下步驟：1)在無菌條件下，將生長旺盛的人參細胞轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基上，在23±2℃的暗環(huán)境下培養(yǎng)；2)將放置人參細胞的人參細胞容器進行分別存放，50％體積量的人參細胞讓其自然生長；50％體積量的人參細胞每隔2～3天放置于紫外燈下照射2～6h，30天后得到紫色人參組織細胞；3)將步驟2)得到的紫色人參組織細胞加入浸出溶劑后放置，得到浸出液，測定370nm吸收光度值。本發(fā)明紫色人參組織細胞的培養(yǎng)方法，通過將人參細胞通過紫外滅燈照射，改變?nèi)藚⒓毎纳L培育的環(huán)境，得到紫色的人參細胞，通過人參細胞的生物轉(zhuǎn)化，得到天然的花青素，過程簡單，容易操作。

技術領域

本發(fā)明涉及細胞培養(yǎng)技術領域，具體涉及的是一種紫色人參組織細胞的培養(yǎng)方法。

背景技術

人參是名貴的滋補藥材，被大量應用于食品、飲料、化妝品許多行業(yè)，需求量增加。從原料供給的觀點，人參栽培比較困難，受自然條件的影響大，收獲周期長，且占用大量耕地。植物組織培養(yǎng)和細胞培養(yǎng)可以克服以上的問題，還可以通過人工調(diào)節(jié)生產(chǎn)環(huán)境或條件獲得一些其他物質(zhì)。人參組織培養(yǎng)的研究，在上60年代初就開始了。經(jīng)過多年的發(fā)展，已經(jīng)取得巨大的成就。通過改變培養(yǎng)的條件達到組織細胞培養(yǎng)和生物轉(zhuǎn)化的目的。

人參組織的培養(yǎng)在光照和黑暗條件下均可發(fā)生，但繼代培養(yǎng)時的光照對人參組織培養(yǎng)有明顯的抑制作用。目前大部分的人參組織細胞培養(yǎng)均采用黑暗條件下培養(yǎng)。

也有研究通過輻射來獲得高產(chǎn)的細胞株。運用500-3000R(倫琴)的Co60γ射線處理人參細胞，結(jié)果表明1000-2000R能促進組織生產(chǎn)，而500-2000R的劑量同時還具有提高培養(yǎng)物中皂苷的含量，輻射處理的影響可以持續(xù)到多次繼代培養(yǎng)。但該方法缺點是Co60需要專業(yè)機構(gòu)去照射，實際應用不方便。

發(fā)明內(nèi)容

針對上述不足之處，本發(fā)明的目的在于提供一種紫色人參組織細胞的培養(yǎng)方法，其具有制備過程簡單，操作方便的優(yōu)點。

本發(fā)明的技術方案概述如下：

一種紫色人參組織細胞的培養(yǎng)方法，其中，包括如下步驟：

1)在無菌條件下，將生長旺盛的人參細胞轉(zhuǎn)接到MS培養(yǎng)基上，在23±2℃的暗環(huán)境下培養(yǎng)1～2天；

2)將放置人參細胞的人參細胞容器進行分別存放，50％體積量的人參細胞讓其自然生長；50％體積量的人參細胞每隔2～3天，放置于紫外燈下照射2～6h，然后放回暗環(huán)境讓其自然生長；30天后得到紫色人參組織細胞；

3)將步驟2)得到的人參組織細胞加入樣品瓶中，加入浸出溶劑后放置1-3h，得到浸出液，將浸出液置于紫外分光光度計測量容器中，測定370nm吸收光度值，根據(jù)吸光光度值判斷紫色人參組織細胞中花青素的含量，得到紫色人參組織細胞培養(yǎng)情況。

優(yōu)選的是，所述的紫色人參組織細胞的培養(yǎng)方法，其中，所述紫外燈的功率為20～40W。

優(yōu)選的是，所述的紫色人參組織細胞的培養(yǎng)方法，其中，所述浸出溶劑包括甲醇和鹽酸，其體積比為10:1。

優(yōu)選的是，所述的紫色人參組織細胞的培養(yǎng)方法，其中，所述鹽酸的濃度為0.2～0.6mol/L。

優(yōu)選的是，所述的紫色人參組織細胞的培養(yǎng)方法，其中，所述步驟3)放置時間為1.5-2h。

本發(fā)明的有益效果是：

本發(fā)明紫色人參組織細胞的培養(yǎng)方法，通過將人參細胞通過紫外滅燈照射，改變?nèi)藚⒓毎纳L培育的環(huán)境，得到紫色的人參細胞，通過人參細胞的生物轉(zhuǎn)化，得到天然的花青素，過程簡單，容易操作。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步的詳細說明，以令本領域技術人員參照說明書文字能夠據(jù)以實施。