[發明專利]一種反相分離介質及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201911382992.8
• 申請日: 2019-12-27
• 公開（公告）號: CN111001188B
• 公開（公告）日: 2021-11-16
• 發明（設計）人: 劉曉東;趙智糧
• 申請（專利權）人: 納譜分析技術（蘇州）有限公司
• 主分類號: B01D15/32
• 分類號: B01D15/32
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

本發明提供了一種反相分離介質及其制備方法和應用，包括固定相以及包覆在固定相表面的中性親水包覆層；其中，所述中性親水包覆層上通過?O?CO?NH?化學鍵合有反相疏水基團。本發明提供的反相分離介質具有耐水性好，立體選擇性高，和離子交換作用干擾低的特性。

技術領域

本發明屬于液相色譜分離技術領域，涉及一種反相分離介質及其制備方法和應用。

背景技術

高效液相色譜(HPLC)是一種重要的分析工具，適用于分離各種帶不同電荷、疏水性、極性、結構、大小等的化合物，因此需要不同的固定相。其中，最常用的是C18或類C18固定相。

在中性條件下，堿性化合物與固定相表面未衍生的硅羥基的相互作用會導致峰拖尾。目前常用的解決方案是通過對硅膠表面用C18的硅烷化試劑進行高密度鍵合，隨后再用過量的封端試劑多次處理來最大程度地減少表面硅羥基的殘留。但是，用這種方法所得到的反相固定相具有很強的疏水性，導致“疏水塌陷”從而大大降低待分析物的保留并且影響重現性，因此不適合在100％的水相中使用。親水封端技術通常用于克服“疏水塌陷”的問題，但此方法而生成的反相固定相化學穩定性較低，因而在許多情況下會存在堿性化合物在中性條件下的拖尾現象。

另一個解決方案是在反相鍵合相中引入極性嵌入基團。這些鍵合相包含疏水基團和親水性嵌入基團(在疏水基團和與硅膠表面的鍵合點之間)。常用的極性嵌入基團包含酰胺、尿素、乙醚和氨基甲酸酯等基團。一般來說，極性嵌入反相固定相具有以下優點：

1、與傳統的Cl8填料相比，堿性化合物具有良好的峰形；

2、與傳統的Cl8填料相比，與純水相流動相具有良好的相容性；

3、與傳統的C18相比，具有不同(互補)的選擇性；

4、與傳統的C18相比，具有較高的立體選擇性，能更好地分離結構相關化合物。

在合成反相極性嵌入固定相的過程中會很容易引入少量的陰離子交換基團，從而導致在使用過程中酸性化合物的拖尾。這個問題可以通過以下合成方法來緩解：1)首先合成極性嵌入反相硅烷化試劑；2)然后進行硅膠表面鍵合。這就要求在合成極性嵌入反相硅烷化試劑的過程中采取相應的措施避免可導致離子交換不良副產物的生成，或者有效地去除此類物質的方法。這些措施無疑會增加技術難度和成本。

CN1421693A公開了一種烷基硅膠鍵合色譜固定相及其制備方法，鍵合鏈嵌入酰胺極性基團，并具有雙齒結構，還提供它的制備方法，包括如下步驟：

a.將硅膠微粒與硅烷偶聯劑在有機溶劑中于70-130℃反應4-10小時；b.再與酰氯于20-130℃反應8-48小時后制得該固定相；該專利申請的內部酰胺基團與微粒硅膠上殘留的硅醇基形成氫鍵或離子對，能更好地屏蔽硅醇基活性，消除殘留硅醇基的影響，但是選擇性較差。

因此，希望開發一種反相分離介質以解決目前耐水型反相分離介質以及相關色譜柱生產和使用所遇到的挑戰，包括耐水性，離子交換作用干擾，酸性和堿性化合物的峰形，以及合成方法等。

發明內容

本發明提供了一種反相分離介質及其制備方法和應用。本發明提供的反相分離介質具有耐水性好，立體選擇性高，和離子交換作用干擾低的特性。

為達此目的，本發明采用以下技術方案：

第一方面，本發明提供了一種反相分離介質，包括固定相以及包覆在固定相表面的中性親水包覆層；

其中，所述中性親水包覆層上通過-O-CO-NH-化學鍵合有反相疏水基團。

本發明提供的反相分離介質包括三部分：

(A)帶有表面硅羥基的固定相；

(B)以共價鍵的形式包覆在上述固定相表面的中性親水包覆層；