[發明專利]一種從衣藻提取油脂的方法

在審

• 申請號: 201911381543.1
• 申請日: 2019-12-27
• 公開（公告）號: CN110903897A
• 公開（公告）日: 2020-03-24
• 發明（設計）人: 沈蘭蘭
• 申請（專利權）人: 沈蘭蘭
• 主分類號: C11B1/10
• 分類號: C11B1/10;C11B3/16;C12N1/12;C12R1/89
• 代理公司: 廣州君咨知識產權代理有限公司 44437
• 代理人: 江超

1.一種從衣藻提取油脂的方法，其特征在于：所述的從衣藻提取油脂的方法包括以下步驟：

步驟1：衣藻的培養：將活化后的培養至對數生長期的新鮮微藻培養液，按照10%(v/v)的接種量接種到含有新鮮配制的微藻培養基的三角燒瓶中中，用4層紗布包裹瓶口，將所述的三角燒瓶放置于光照培養箱中進行培養；

步驟2：干微藻粉的制備：計量步驟1中培養好的衣藻培養液的體積，置于離心管中第一次離心得到第一衣藻藻體沉淀和第一上清液，棄去所述的第一上清液；用蒸餾水清洗所述的第一衣藻藻體沉淀，進行第二次離心得到第二衣藻藻體沉淀和第二上清液，收集所述的第二衣藻藻體沉淀，將所述的第二衣藻藻體沉淀置于65℃電熱鼓風干燥箱中烘干至恒重，記錄第二衣藻藻體沉淀干重即得所述的干微藻粉，計算干微藻粉的生物量如下：

步驟3：油脂的提?。簩⒉襟E2制備得到的干微藻粉準確稱取100mg干藻粉中加入鹽酸振蕩混勻后，室溫下放置20~40min，隨后置于沸水浴中5~15min，立刻轉入-100~-60℃冷凍10~30min，如此反復凍融3次；然后加入2倍體積的三氯甲烷和甲醇的混合液，混合均勻后離心，所述干微藻粉的油脂溶解于下層的三氯甲烷中，用移液槍吸取下層含有油脂的三氯甲烷層，將有含有油脂的三氯甲烷烘干后即得油脂，稱重，計算油脂含量和油脂產量，計算公式如下：

2.根據權利要求1所述的一種從衣藻提取油脂的方法，其特征在于：步驟1中每1L所述的微藻培養基中含有NaNO30.25g、K2HPO4·3H2O0.075g 、MgSO4·7H2O0.075g、CaCl2·2H2O0.025g、KH2PO40.175g、NaCl0.025g、土壤提取液40mL 、FeCl3?6H2O0.005g、Fe-EDTA1mL。

3.根據權利要求1所述的一種從衣藻提取油脂的方法，其特征在于：所述的步驟1中所述的培養條件為：光照強度為80~120μmol·m^-2·s^-1，光暗周期為（14~18）h：（6~10）h，20~30℃恒溫培養，培養10~18d。

4.根據權利要求3所述的一種從衣藻提取油脂的方法，其特征在于：所述的光照的光質為紅光和藍光，所述的紅光和藍光組合比例為（1~3）：（1~3）。

5.根據權利要求1所述的一種從衣藻提取油脂的方法，其特征在于：所述的步驟2中的第一次離心和第二次離心的的轉速均為4000~6000r/min，離心時間為5~15mi。

6.根據權利要求1所述的一種從衣藻提取油脂的方法，其特征在于：所述的步驟3中鹽酸的物質的量濃度為3~5mol/L，所述的干微藻粉的重量和鹽酸的體積之比為100mg：（4~8）mL。

7.根據權利要求1所述的一種從衣藻提取油脂的方法，其特征在于：所述的步驟3中的三氯甲烷和甲醇的體積比為1：（0.8~1.2）。

8.根據權利要求1所述的一種從衣藻提取油脂的方法，其特征在于：所述的步驟3中第三次離心的轉速為6000~10000r/min，所述的第三次離心的時間為3~6min。