[發(fā)明專利]一種低氧快速習服動物模型的構(gòu)建方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201911377882.2 | 申請日： | 2019-12-27 |
| 公開（公告）號： | CN111011310A | 公開（公告）日： | 2020-04-17 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 王小波;余志斌;趙汝舟;程九華;蔣帥 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學 |
| 主分類號： | A01K67/027 | 分類號： | A01K67/027 |
| 代理公司： | 西安通大專利代理有限責任公司 61200 | 代理人： | 馬貴香 |
| 地址： | 710032 陜西*** | 國省代碼： | 陜西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 低氧 快速 習服 動物 模型 構(gòu)建 方法 | ||
本發(fā)明公開了一種低氧快速習服動物模型的構(gòu)建方法，本發(fā)明構(gòu)建的低氧快速習服動物模型造模方法簡單，只需通過預先禁食，使大鼠適應，再在低壓艙中進行4500m的氣壓習服，且本發(fā)明成本低、周期短，最快34h即可成模，成模率高，可以達到100％，本發(fā)明的模型重復性好，穩(wěn)定，可以逐步過渡到人體實驗。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于生物領(lǐng)域，具體涉及一種低氧快速習服動物模型的構(gòu)建方法。
背景技術(shù)
我國高原面積遼闊,占國土面積的1/4左右,其中青藏高原的平均海拔在4000m以上，構(gòu)成中印邊界的喜馬拉雅山脈海拔更是達到了7000m以上。我們知道，高度每增加5km，大氣壓約降低為原來的1/2，那么氧分壓也隨之降低；在海拔7500m處，大氣壓力由760mmHg降低為287mmHg，氧分壓由150mmHg降低為50mmHg左右，已難以滿足機體的需求，導致急性高空缺氧，對于未經(jīng)低氧習服的哺乳動物，在此高度只能停留時間數(shù)分鐘，延長停留時間可導致意識喪失直至死亡。在這些地區(qū)發(fā)生突發(fā)狀況，可能需要長期生活在低海拔地區(qū)的人們迅速進入高原地區(qū)執(zhí)行任務，而緊急進入高原地區(qū)由于低氣壓、低氧的影響，易造成初入高原人群發(fā)生高原反應，甚至威脅生命安全。目前針對預防高原反應的研究越來越多，主要的預防措施有階梯上升、口服藥物等措施。目前公認的高原習服方案為階梯上升，雖然效果顯著但費時費力，難以應對突發(fā)狀況。另外有大量研究認為，提前口服紅景天有一定的預防作用，但其有效性不穩(wěn)定，療效個體差異較大。因此，如何實現(xiàn)低氧快速習服仍是目前亟待解決的熱點問題。有研究發(fā)現(xiàn)，SD大鼠應對低壓低氧刺激的信號通路和人體有高度的相似性。因此，利用SD大鼠模型研究低氧快速習服，可以為人體實現(xiàn)低氧快速習服提供有效的實驗依據(jù)。建立一個有效的低氧快速習服SD大鼠模型對此領(lǐng)域的研究有重要意義。
目前研究中使用的SD大鼠低氧習服方案多種多樣，但大部分方案均是通過階梯上升來達到SD大鼠在預定高度的習服。例如，Ahmad Y等發(fā)現(xiàn)，SD大鼠在7600m的環(huán)境中因急性低氧全部死亡，而將大鼠在4500m習服10h，然后在常壓常氧放置1h，隨后立即放入7600m，24h后大鼠全部存活。此外，還有常壓缺氧、循環(huán)性缺氧、血液性缺氧、組織性缺氧等模型。這些模型提示SD大鼠具備快速低氧習服能力，但是，我們在重復實驗中發(fā)現(xiàn)一些問題：AhmadY等的動物模型，效果并不穩(wěn)定，SD大鼠經(jīng)過這些處理后(實驗條件嚴格依照Ahmad Y等報導參數(shù)執(zhí)行)，在7600m的環(huán)境中無法實現(xiàn)100％存活。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述不足，提供一種低氧快速習服動物模型的構(gòu)建方法，決了以往模型中的不穩(wěn)定與可重復性差等問題，為下一步在人開展快速低氧習服方案的探索，提供了實驗數(shù)據(jù)與良好借鑒。
為了達到上述目的，本發(fā)明包括以下步驟：
步驟一，隨機選取若干大鼠，并預先禁食24h，只提供飲水，使大鼠適應；
步驟二，將大鼠置于恒溫變壓艙中，關(guān)閉艙門，以10m/s速度模擬上升至海拔4500m的氣壓高度，僅給大鼠提供食物和飲水，使大鼠習服；
步驟三，以20m/s速度緩慢降至當前海拔高度，打開艙門放置，使大鼠習服；
步驟四，關(guān)閉艙門，以10m/s速度上升至海拔7600m的氣壓高度，并在艙內(nèi)向大鼠提供食物和水，觀測大鼠缺氧耐力；
步驟五，以20m/s速度緩慢降至當前海拔高度，打開艙門，完成動物模型的構(gòu)建。
步驟一中，大鼠為健康SPF級雄性的SD大鼠，體重為200～250g。
步驟一中，使大鼠適應的環(huán)境溫度為22±5℃，濕度為50±5％。
步驟二中，關(guān)閉艙門后，保持艙內(nèi)恒定溫度為22±5℃，濕度為50±5％，氣流流速為4L/min。
步驟二中，海拔4500m的氣壓高度維持10h。
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