[發(fā)明專利]一種柑桔脫毒黃化砧木的高效培育方法及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911375848.1
• 申請日: 2019-12-27
• 公開（公告）號: CN110896842B
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姜玲;詹平;劉肇先;汪彩云
• 申請（專利權(quán)）人: 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: A01G31/00
• 分類號: A01G31/00;A01G24/10;A01G24/15;A01G2/30;A01C1/00
• 代理公司: 北京金智普華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11401
• 代理人: 楊采良

本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)種植技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種柑桔脫毒黃化砧木的高效培育方法及其應(yīng)用。方法主要包括：將新鮮果實(shí)中枳殼種子取出，在45℃溫水浸泡，自然冷卻，種子繼續(xù)在200mg/L的聚?γ?谷氨酸(PGA)中浸泡8小時(shí)。然后，撕開外種皮(無須去除外種皮)，將種子播種到含有1/2垤石和1/2沙的培養(yǎng)基質(zhì)中，在培養(yǎng)缽中26℃，黑暗條件下培養(yǎng)2周，培育出的黃化砧木整齊一致，粗度達(dá)2?3mm，黃化砧木經(jīng)嚴(yán)格的消毒，被方便地用于柑桔莖尖微芽嫁接脫毒。本發(fā)明的黃化砧木的準(zhǔn)備程序與傳統(tǒng)的無菌條件培養(yǎng)砧木相比，具有操作簡單，節(jié)省時(shí)間，降低勞動(dòng)強(qiáng)度，降低成本，節(jié)省能源的優(yōu)點(diǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)種植技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種柑桔脫毒黃化砧木的高效培育方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

柑桔是全世界的大宗水果，柑桔黃龍病和其它病毒病對柑桔生產(chǎn)造成毀滅性的打擊。無病毒苗木的生產(chǎn)成為柑桔產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的必經(jīng)之路。

由于病毒類病害的系統(tǒng)侵染性，目前尚無有效的治療方法，采用柑桔無病毒苗木是控制柑桔病毒病傳播，促進(jìn)柑桔生產(chǎn)可持續(xù)發(fā)展非常重要的措施之一。當(dāng)前世界各國預(yù)防柑桔病毒類病害的通行做法是采用莖尖嫁接或熱處理加莖尖嫁接方式對病毒進(jìn)行脫除，然后栽種無病毒苗木。但目前，柑桔脫毒操作技術(shù)要求高，操作環(huán)節(jié)復(fù)雜，獲得無病毒素苗木十分困難。

如申請?zhí)枮镃N201410132037.X，名稱為《柑桔接穗預(yù)處理促使復(fù)合感染病原脫除的技術(shù)》的中國發(fā)明專利，是本申請的發(fā)明人早前研發(fā)的通過小分子殺細(xì)菌三氯生(TCL)及幾種抗生素處理，獲得脫除柑桔衰退病(CTV)和柑桔黃龍病(HLB)病原的無病毒莖尖材料。為莖尖微芽嫁接或嫩芽嫁接提供了病原濃度低或無病毒的莖尖材料。

申請?zhí)枮镃N201510896416.0，名稱為《一種高效脫除柑橘碎葉病毒的方法》的中國發(fā)明專利，通過將感染了柑橘碎葉病毒的柑橘植株采用脈沖溫度進(jìn)行熱處理，解決了傳統(tǒng)高溫?zé)崽幚砀探壑仓瓴荒苷ＩL，導(dǎo)致植株熱傷害，萌發(fā)無毒化嫩芽數(shù)量少的問題，從而促進(jìn)萌發(fā)更多數(shù)量的無毒化嫩芽莖尖。

上述兩篇現(xiàn)有技術(shù)主要是提供無毒莖尖材料，而莖尖嫁接中的黃化砧木的培養(yǎng)通常采用組織培養(yǎng)無菌操作，準(zhǔn)備工作繁瑣，工作量大，技術(shù)要求高。

申請?zhí)枮镃N201711375148.3，名稱為《一種生物控制劑在脫除柑橘幼樹黃龍病病原中的應(yīng)用》的中國發(fā)明專利，是本申請的發(fā)明人早前針對柑橘幼樹黃龍病病原去除研發(fā)的相關(guān)技術(shù)，主要通過對苗木噴施特定芽孢桿菌菌株的發(fā)酵液來降低莖尖帶毒濃度，從而提高脫毒效率。

但是，上述方法僅是解決了苗木上黃龍病病原去除的問題，而在莖尖嫁接中的黃化砧木準(zhǔn)備過程中依然存在著準(zhǔn)備工作十分繁瑣，勞動(dòng)強(qiáng)度大，成本高，技術(shù)要求高，人員素質(zhì)要求高等問題，從而影響出苗效率及后續(xù)脫毒工作。因此，在柑桔莖尖嫁接脫毒操作中，簡化黃化砧木的培育程序至關(guān)重要。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，本發(fā)明提供了一種柑桔脫毒黃化砧木的高效培育方法及其應(yīng)用，目的在于解決現(xiàn)有技術(shù)中的一部分問題或至少緩解現(xiàn)有技術(shù)中的一部分問題。

本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的，一種柑桔脫毒黃化砧木的高效培育方法，包括：將新鮮果實(shí)中枳殼種子取出，在45℃溫水浸泡后，自然冷卻；之后繼續(xù)在200mg/L的聚-γ-谷氨酸中浸泡；然后，撕開外種皮，將種子播種到由垤石和沙組成的培養(yǎng)基質(zhì)中，在培養(yǎng)缽中26℃，黑暗條件下培養(yǎng)，培育出黃化砧木。培育出的黃化砧木整齊一致，粗度達(dá)2-3mm，黃化砧木經(jīng)嚴(yán)格的消毒，被方便地用于柑桔莖尖微芽嫁接脫毒。

進(jìn)一步地，所述聚-γ-谷氨酸的濃度為200mg/L。

進(jìn)一步地，在聚-γ-谷氨酸中浸泡時(shí)間為8小時(shí)。

進(jìn)一步地，在撕開外種皮后無需去除外種皮和內(nèi)種皮。

進(jìn)一步地，培養(yǎng)基中所述垤石和沙的比例為1：1。