[發明專利]一種非營養型芽孢萌發劑及其應用

在審

• 申請號: 201911373969.2
• 申請日: 2019-12-27
• 公開（公告）號: CN111004751A
• 公開（公告）日: 2020-04-14
• 發明（設計）人: 王衛;閆巖
• 申請（專利權）人: 南京巨鯊顯示科技有限公司;南京巨鯊醫療科技有限公司;南京巨鯊商貿有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/07
• 代理公司: 南京縱橫知識產權代理有限公司 32224
• 代理人: 劉艷艷

本發明公開了一種非營養型芽孢萌發劑及其應用，芽孢萌發劑由溶菌酶、陽離子表面活性劑、鹽、有機酸和水混合而成，所述芽孢萌芽劑的pH為4.0?7.0。該芽孢萌發劑通過添加特定比例的溶菌酶，水解芽孢皮層的肽聚糖，進而激活芽孢萌發反應。在pH 4.0?7.0范圍內，芽孢可快速萌發生長。通過在嗜熱脂肪芽孢桿菌培養基中添加特定比例的芽孢萌發劑，以制備出芽胞恢復生長培養基，促進嗜熱脂肪芽胞桿菌芽胞發芽，并恢復至營養菌體繁殖階段。

技術領域

本發明屬于微生物培養基領域，具體涉及一種非營養型芽孢萌發劑及其應用。

背景技術

在生存條件惡劣下，如營養物質不充分、代謝廢物累積等，產芽胞菌種生長停滯，產生芽胞。芽胞是營養細胞的休眠體，在較長時間內保持休眠狀態，能抵抗多種外界壓力，如高溫，高壓，高寒，營養缺乏等。在合適條件下，通常是在營養物質的激活下，同芽胞營養性發芽受體結合，引發細胞內級聯信號轉導，誘導芽胞發芽并恢復營養菌體生長。芽胞發芽是微生物芽胞在暴露于能支持微生物生長的條件之后發生的一系列不可逆、復雜的生化事件，使芽胞進入營養菌體繁殖階段。芽胞的高度抗逆性提高了細菌的存活，也可利用其高度的抗性進行滅菌監測。

生物指示劑是滅菌監測的金標準，通過標準化的菌株及符合要求的抗力來對特定滅菌過程進行監測。生物指示劑中所用菌株比器械或敷料上真實的微生物負荷的抗力更大，因此通過生物指示劑可對滅菌過程進行檢測，保證滅菌有效性。

嗜熱脂肪芽胞桿菌對熱具有較高抗性，嗜熱脂肪芽胞桿菌芽胞比其營養菌體的熱抗性更強，常用作壓蒸汽滅菌生物指示劑的指示菌種。包含有芽胞的生物指示劑在進行活菌計數，抗力測試或滅菌結束進行培養時，需誘導芽胞發芽生長。在芽胞恢復生長培養基的誘導下芽胞發芽并生長，但普通培養基誘導芽胞發芽率極低。

專利CN201610273256.9公開了一種芽胞恢復生長培養基，其由液體或固體基質和發芽因子組成。公開的發芽因子為酵母浸膏、或磷酸二氫鉀、或磷酸氫二鉀、或組氨酸、或脯氨酸、或L-纈氨酸、或L-亮氨酸、或淀粉、或葡萄糖、或肌酐、或吡啶二羧酸DPA、或吡啶二羧酸鈣鹽CaDPA中的一種或多種。

專利CN 107475173A公開了一種濕熱脂肪芽孢桿菌芽孢培養助劑，培養基及應用，其公開的培養助劑為果糖、DL-色氨酸、谷胱甘肽和對氨基苯甲酸。用于促進芽孢的加快萌發。

現有技術具有以下缺陷：以上兩篇專利公開的均為促進芽孢恢復生長的因子均為營養性萌發劑，營養性萌發劑的儲存條件受環境影響較大，配置好的帶萌發劑的恢復生長培養基保存的有效期較短。

發明內容

目的：為解決現有技術的不足，本發明提供一種非營養型芽孢萌發劑及其應用。

技術方案：為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案為：

第一方面，提供一種非營養型芽孢萌發劑，所述芽孢萌發劑由溶菌酶、陽離子表面活性劑、鹽、有機酸和水混合而成，所述芽孢萌芽劑的pH為4.0-7.0。

在一些實施例中，所述芽孢萌發劑原料組分及其質量百分比為：

在一些實施例中，所述的陽離子表面活性劑為1,12-十二烷胺、月桂胺、十二烷氧基丙胺中的一種或幾種。

在一些實施例中，所述鹽為氯化鉀、氯化鈉、硫酸鉀、硫酸鈉中的一種或幾種。

在一些實施例中，所述有機酸為檸檬酸、丁二酸、草酸、羥基乙酸中的一種或幾種。

在一些實施例中，所述的非營養型芽孢萌發劑需要經過滅菌處理方可以使用，優選的，所述芽孢萌發劑經過121℃高壓蒸汽滅菌15min處理。

第二方面，提供所述的非營養型芽孢萌發劑在嗜熱脂肪芽孢桿菌芽孢的萌芽及恢復生長中的應用。