[發明專利]一種間充質干細胞培養基

在審

• 申請號: 201911372704.0
• 申請日: 2019-12-27
• 公開（公告）號: CN110951681A
• 公開（公告）日: 2020-04-03
• 發明（設計）人: 姜東花;其他發明人請求不公開姓名
• 申請（專利權）人: 南京溫博生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種間充質干細胞培養基。研究表明，過度的體外長期傳代培養會造成干細胞老化，多向分化能力降低，對疾病的治療效果也會大打折扣。本發明發現，普魯蘭糖可以降低人羊膜間充質干細胞的老化程度，但是并不明顯影響人羊膜間充質干細胞的干細胞特性，不會影響其多向分化能力。因此，可以在人羊膜間充質干細胞培養基中添加有效濃度的普魯蘭糖制成抗人羊膜間充質干細胞老化的培養基。

技術領域

本發明屬于生物領域，涉及干細胞培養，具體涉及一種間充質干細胞培養基。

背景技術

羊膜間充質干細胞是一類來源于羊膜的干細胞。與其他來源的干細胞相比，羊膜間充質干細胞具有低免疫原性和免疫抑制的特點，這使得羊膜間充質干細胞的移植副作用較小。羊膜間充質干細胞移植治療一些炎癥相關疾病，取得了較好的效果，相關臨床試驗在逐步開展。

使用羊膜間充質干細胞治療疾病，就不可避免的涉及到體外短期或長期傳代培養。但是，研究表明，過度的體外長期傳代培養會造成干細胞老化，多向分化能力降低，對疾病的治療效果也會大打折扣。

因此，體外抗老化傳代培養研究是體外培養羊膜間充質干細胞的一個重要研究方向。

發明內容

本發明旨在提供一種普魯蘭糖體外抗人羊膜間充質干細胞老化和制備人羊膜間充質干細胞培養基方面的應用。

本發明目的通過以下技術方案實現：

一種普魯蘭糖用于體外抗人間充質干細胞老化的用途。β-半乳糖苷酶染色法是一種基于衰老時SA-β-Gal活性水平上調而對衰老細胞或組織進行染色檢測的方法，從而在普通的光學顯微鏡下就可以觀測到細胞或組織的衰老情況。β-半乳糖苷酶染色結果表明，在培養基中加入普魯蘭糖可以有效延緩人羊膜間充質干細胞的衰老。

進一步地，所述間充質干細胞為羊膜間充質干細胞。

一種普魯蘭糖在制備抗人間充質干細胞老化的培養基中的應用。

進一步地，所述間充質干細胞為羊膜間充質干細胞。

有益效果：

本發明發現，普魯蘭糖可以降低人羊膜間充質干細胞的老化程度，但是并不明顯影響人羊膜間充質干細胞的干細胞特性，不會影響其多向分化能力。因此，可以在人羊膜間充質干細胞培養基中添加有效濃度的普魯蘭糖制成抗人羊膜間充質干細胞老化的培養基。

附圖說明

圖1為人羊膜間充質干細胞的流式細胞術結果；

圖2為各組不同代次人羊膜間充質干細胞SA-β-Gal染色陽性率。

具體實施方式

下面結合具體的實施例來介紹本發明的實質性內容，但不能以此限定本發明保護范圍。

實施例1：普魯蘭糖抗人羊膜間充質干細胞老化的藥效

一、實驗材料

D-Hanks液購自廣州沛瑜生物制品有限公司。

胰蛋白酶購自上海恒渡生物科技有限公司。

Ⅱ型膠原酶購自愛必信(上海)生物科技有限公司。

DMEM/F12培養基、FBS和青鏈霉素購自Gibco公司。

普魯蘭糖(CAS號9057-02-7)購自上海源葉生物科技有限公司，純度≥99％。

流式鑒定使用到的熒光標記流式抗體為Beckman公司產品。

β-半乳糖苷酶染色試劑盒購自上海源葉生物科技有限公司。

二、實驗方法