[發明專利]一種諾卡氏菌的培養方法

有效

• 申請號: 201911357043.4
• 申請日: 2019-12-25
• 公開（公告）號: CN110885775B
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發明（設計）人: 王文勇
• 申請（專利權）人: 廣州科力生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/365
• 代理公司: 廣州科沃園專利代理有限公司 44416
• 代理人: 張帥

1.一種諾卡氏菌的培養方法，其特征在于，所述諾卡氏菌培養方法包括以下步驟:

S1、制備諾卡氏菌培養基：按重量百分比計，由以下組分組成：葡萄糖0.5％～2％、酵母粉0.5％～2％、胰蛋白胨0.5％～2％、檸檬酸鈉0.3％～0.5％、丙酮酸鈉0.3％～0.5％、萘啶酮酸0.02％～0.06％、鹽酸半胱氨酸0.2％～0.6％和余量去離子水，按照比例成分稱取制備諾卡氏菌培養基，在65℃下微波爐中加熱2min，直至固體溶解，然后加入2.5％NaOH調節pH到7.0～7.2，高壓滅菌鍋滅菌30min，冷卻即得諾卡氏菌培養基；

S2、種子液制備：取步驟S1所制備的諾卡氏菌培養基，加入2.5％NaOH調節pH到7.0-7.2，然后接種諾卡氏菌的初始菌液，然后在280～350r/min、28～30℃的恒溫搖床中培養32h得到種子液；

S3、發酵培養：在機械攪拌式發酵罐中加入罐容積65％的液體培養基，然后取培養基容積5％～10％由S1步驟制得的種子液，接種到機械攪拌式發酵罐中，并調整通氣量為1:0.8～1.01。

2.根據權利要求1所述的諾卡氏菌的培養方法，其特征在于，所述步驟S1中的諾卡氏菌培養基，按重量百分比計，由以下組分組成：葡萄糖1％～1.5％、酵母粉1％～1.5％、胰蛋白胨1％～1.5％、檸檬酸鈉0.4％～0.45％、丙酮酸鈉0.4％～0.45％、萘啶酮酸0.04％～0.05％、鹽酸半胱氨酸0.2％～0.6％和余量去離子水。

3.根據權利要求1所述的諾卡氏菌的培養方法，其特征在于，特征在于，所述步驟S1中的諾卡氏菌培養基，按重量百分比計，由以下組分組成：葡萄糖1％、酵母粉1％、胰蛋白胨2％、檸檬酸鈉0.3％、丙酮酸鈉0.3％、萘啶酮酸0.02％、鹽酸半胱氨酸0.2％和余量去離子水。

4.根據權利要求1所述的諾卡氏菌的培養方法，其特征在于，特征在于，所述步驟S1中的諾卡氏菌培養基，還包括消泡劑，所述消泡劑為聚甘油脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯的組合物。

5.根據權利要求4所述的諾卡氏菌的培養方法，其特征在于，所述培養中的消泡劑重量百分比為0.01％～0.05％。

6.根據權利要求4所述的諾卡氏菌的培養方法，所述培養中的消泡劑重量百分比為0.04％。

7.根據權利要求4所述的諾卡氏菌的培養方法，所述消泡劑中聚甘油脂肪酸酯與蔗糖脂肪酸酯的重量份數比為1：3～5。

8.根據權利要求4所述的諾卡氏菌的培養方法，所述消泡劑中聚甘油脂肪酸酯與蔗糖脂肪酸酯的重量份數比為1:4。

9.根據權利要求1～8項任一項所述的諾卡氏菌的培養方法，其特征在于，所述培養方法用于工業規模的諾卡氏菌發酵。