[發(fā)明專利]煙草NtMYB12基因及其在調(diào)控脂肪酸合成中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911355067.6
• 申請(qǐng)日: 2019-12-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110923246B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-07-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王中;楊軍;武明珠;李鋒;謝小東;張劍鋒;李澤鋒;羅朝鵬;魏攀;王晨
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)煙草總公司鄭州煙草研究院
• 主分類號(hào): C12N15/29
• 分類號(hào): C12N15/29;C07K14/415;C12N15/82;A01H5/10;A01H6/82;C12N15/10
• 代理公司: 鄭州聯(lián)科專利事務(wù)所(普通合伙) 41104
• 代理人: 張曉萍

1.煙草NtMYB12基因在煙草種子脂肪酸合成中的應(yīng)用，其特征在于，利用基因沉默技術(shù)、基因編輯或者基因超表達(dá)方法，通過(guò)下調(diào)煙草NtMYB12基因表達(dá)量來(lái)升高煙草種子中脂肪酸含量，或者通過(guò)升高煙草NtMYB12基因表達(dá)量來(lái)下調(diào)煙草種子中脂肪酸含量；

所述煙草NtMYB12基因，其堿基序列如SEQ ID NO.1所示。

2.煙草NtMYB12轉(zhuǎn)錄蛋白在煙草種子脂肪酸合成調(diào)控中的應(yīng)用，其特征在于，煙草NtMYB12轉(zhuǎn)錄蛋白表達(dá)量或含量升高后，煙草種子中脂肪酸含量降低；降低煙草NtMYB12轉(zhuǎn)錄蛋白含量后，煙草種子中脂肪酸含量升高；

所述煙草NtMYB12轉(zhuǎn)錄蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.利用煙草NtMYB12基因的煙草品種培育方法，其特征在于，通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)、瞬時(shí)表達(dá)技術(shù)或基因組編輯技術(shù)，構(gòu)建含有煙草NtMYB12基因的RNAi干涉載體、超表達(dá)載體或基因組編輯載體，轉(zhuǎn)化煙草，篩選獲得煙草種子脂肪酸含量變化的煙草品種；

所述煙草NtMYB12基因，其堿基序列如SEQ ID NO.1所示。

4.如權(quán)利要求3所述煙草品種培育方法，其特征在于，構(gòu)建含有煙草NtMYB12基因的超表達(dá)載體時(shí)，以pCAMBIA1301質(zhì)粒作為載體，通過(guò)與NtMYB12基因的CDS全長(zhǎng)序列進(jìn)行重組制備獲得，所述NtMYB12基因的CDS全長(zhǎng)序列，具體PCR擴(kuò)增時(shí)，PCR擴(kuò)增用引物序列設(shè)計(jì)為：

NtMYB12a-SpeI-F ：5’-AGAGACTAGTATGGGAAGAGCACCTTGTTGTG-3’，

NtMYB12a-KpnI-R ：5’-TGACGGTACCAGACAAAAGCCAAGCGACAA-3’。

5.如權(quán)利要求3所述煙草品種培育方法，其特征在于，構(gòu)建含有煙草NtMYB12基因的RNAi干涉載體時(shí)，以pHellsgate 2為質(zhì)粒載體，以NtMYB12基因中的部分CDS序列為目標(biāo)序列，構(gòu)建過(guò)程中，針對(duì)NtMYB12基因中的部分CDS序列，具體PCR擴(kuò)增用引物序列設(shè)計(jì)為：

NtMYB12a-R-F：5’-GGGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCTCAAGCCGACCCTCAGTAAAGA-3’，

NtMYB12a-R-R：5’-GGGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGTGCCATTCCATCCCACTATCTGAA-3’。