[發(fā)明專利]一種用于核酸擴(kuò)增的數(shù)字化芯片及方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911343090.3
• 申請(qǐng)日: 2019-12-24
• 公開（公告）號(hào): CN111394234B
• 公開（公告）日: 2022-11-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 秦玉嶺;吳麗;冀海偉;周曉波;劉金霞
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南通大學(xué)
• 主分類號(hào): C12M1/34
• 分類號(hào): C12M1/34;C12M1/00;C12Q1/6851;B01L3/00;B01L7/00
• 代理公司: 南京瑞弘專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32249
• 代理人: 秦秋星

1.一種用于核酸擴(kuò)增的數(shù)字化芯片，包括數(shù)字化檢測(cè)陣列反應(yīng)室、總進(jìn)樣口和總出樣口；其特征在于，數(shù)字化陣列反應(yīng)室包括若干個(gè)主渠道和若干個(gè)微單元，每個(gè)微單元通過(guò)一個(gè)主渠道連通總進(jìn)樣口和總出樣口；所述微單元包括微單元反應(yīng)室，微單元反應(yīng)室的入口和出口分別連通主渠道，且微單元反應(yīng)室入口與主渠道連接處之后的一段主渠道的寬度減小后變大，使主渠道內(nèi)流經(jīng)此處的水相轉(zhuǎn)流到微單元反應(yīng)室內(nèi)，而主渠道內(nèi)流經(jīng)此處的油相繼續(xù)沿著主渠道方向流動(dòng)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于核酸擴(kuò)增的數(shù)字化芯片，其特征在于，所述若干個(gè)主渠道互相平行。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于核酸擴(kuò)增的數(shù)字化芯片，其特征在于，所述數(shù)字化芯片厚度為50-80μ m。

4.基于權(quán)利要求1所述數(shù)字化芯片的核酸擴(kuò)增方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1：將芯片內(nèi)充滿油，連接進(jìn)樣器到總進(jìn)樣口；出樣口連接緩沖瓶，緩沖瓶連接抽氣泵；

步驟2：移液槍取適量PCR試劑戳破進(jìn)樣器密封口，注射進(jìn)入進(jìn)樣器內(nèi)的油中，由于水相比重大于油，PCR反應(yīng)試劑受重力向下墜落；

步驟3：打開抽氣泵，在芯片內(nèi)負(fù)壓條件下，進(jìn)樣器中的液體會(huì)流入微單元反應(yīng)室，微單元反應(yīng)室內(nèi)預(yù)先是充滿油，當(dāng)水相流到微單元反應(yīng)室入口時(shí)，會(huì)轉(zhuǎn)流到微單元反應(yīng)室內(nèi)，而不會(huì)繼續(xù)沿著主渠道流；當(dāng)水相全部流完，油相再次接近微單元反應(yīng)室入口時(shí)，油會(huì)繼續(xù)沿著主渠道流，而不會(huì)進(jìn)入微單元反應(yīng)室，從而實(shí)現(xiàn)將PCR水相密封；

步驟4：待油相將所有的微單元反應(yīng)室密封，且主渠道內(nèi)再次被油相充滿時(shí)，關(guān)閉緩沖瓶止逆閥入口，關(guān)閉抽氣泵，取下緩沖瓶，進(jìn)行PCR擴(kuò)增熱反應(yīng)。