[發明專利]復方丹參制劑七種成分血漿或組織濃度的質譜檢測方法

有效

• 申請號: 201911342229.2
• 申請日: 2019-12-23
• 公開（公告）號: CN110907581B
• 公開（公告）日: 2022-07-01
• 發明（設計）人: 殷瑋;孫晶晶;凌珊;周蘭華;胡鐘芳;謝瑞;吳家欣;戚園梅;張堯君;彭佳裕;蔡文鎮
• 申請（專利權）人: 廣州醫藥研究總院有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 廣州廣典知識產權代理事務所(普通合伙) 44365
• 代理人: 萬志香

本發明涉及一種復方丹參制劑七種成分血漿或組織濃度的質譜檢測方法。該方法包括以下步驟：(1)儲備液的制備：取標準品丹參酮I、丹參酮IIA、丹酚酸B、丹參素、三七皂苷R₁、人參皂苷Rg₁和Rb₁，分別溶解于(80±5)％甲醇水溶液中，制得標準品儲備溶液；取卡馬西平溶解于(80±5)％甲醇水溶液中，制得卡馬西平儲備溶液；(2)工作溶液的制備；(3)待測樣品溶液的制備；(4)將步驟(3)所得待測樣品溶液進行液相色譜分離；將液相色譜分離后的樣品進行質譜分析。本發明方法的檢測過程中色譜峰形極佳，每個化合物的通道都只有唯一的目標峰，避免了其他如溶劑效應等的干擾，操作簡單、分析快速、特異性高、分離度高。

技術領域

本發明涉及藥物分析技術領域，特別是涉及一種復方丹參制劑七種成分血漿或組織濃度的質譜檢測方法。

背景技術

復方丹參制劑由丹參、三七和冰片3味中藥組成，劑型共有9種：復方丹參口服液、復方丹參氣霧劑、復方丹參含片、復方丹參膠囊、復方丹參片、復方丹參顆粒、復方丹參滴丸、復方丹參噴霧劑、復方丹參軟膠囊。復方丹參制劑具有活血化瘀、理氣止痛之功效，用于氣滯血瘀所致的胸痹，癥見胸悶、心前區刺痛、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病心絞痛見上述證候者。臨床應用中單用復方丹參制劑發生不良反應的發生率約為5～7％。其不良反應表現復雜多樣，體內代謝個體差異大,主要為胃腸道反應、頭痛和出血等。大部分不良反應為病人可耐受的輕微損傷、出血等；少部分不良反應需要停藥對癥處理；且復方丹參制劑的療效和不良反應與血漿中藥物濃度密切相關，需要根據血藥濃度調整給藥方案，故有必要對其進行血藥濃度監測。

藥典中規定的復方丹參制劑的含量測定方法為高效液相色譜法，包括丹參酮IIA和丹酚酸B的含量測定方法和三七項下的人參皂苷Rg₁、人參皂苷Rb₁、三七皂苷R₁和人參皂苷Re的測定方法。但是，上述藥典中規定分析方法涉及大量的化學預處理步驟，操作相對繁瑣，特別是丹參酮IIA的含量測定供試品前處理和標定，耗時較長，給實際工作帶來許多不便。

目前，復方丹參制劑血藥濃度測定的常見方法有：高效液相色譜法和液相色譜-質譜聯用法。由于復方丹參制劑七種成分性質差異較大，包含水溶性成分(丹酚酸B、丹參素、三七皂苷R₁、人參皂苷Rg₁、人參皂苷Rb₁)和脂溶性成分(丹參酮I和丹參酮IIA)，而且含量相差較大，因此很難用一種前處理方法進行處理并檢測。導致現在對復方丹參制劑主要成分檢測方法的研究通常采取對于不同成分分開進行前處理和檢測的方法，過程復雜，步驟繁瑣。

發明內容

基于此，本發明的目的之一是提供一種復方丹參制劑七種成分的血漿濃度或組織分布的高效液相色譜串聯質譜檢測方法，該檢測方法操作簡單、分析快速、特異性高、分離度高。

具體技術方案如下：

一種復方丹參制劑七種成分的血漿濃度或組織分布的高效液相色譜串聯質譜檢測方法，包括以下步驟：

(1)儲備溶液的制備：

取標準品丹參酮I、丹參酮IIA、丹酚酸B、丹參素、三七皂苷R₁、人參皂苷Rg₁和Rb₁，分別溶解于(80±5)％甲醇水溶液中，制得標準品儲備溶液；將標準品儲備溶液混合，得到混合標準品儲備溶液；

取卡馬西平溶解于(80±5)％甲醇水溶液中，制得卡馬西平儲備溶液；

(2)工作溶液的制備：

分別用(80±5)％甲醇水溶液稀釋所述混合標準品儲備溶液，制得混合標準曲線樣本工作溶液和混合質控樣本工作溶液；

用(80±5)％甲醇水溶液稀釋所述卡馬西平儲備溶液，制得內標工作溶液；

(3)待測樣品溶液的制備：