[發(fā)明專利]一種鑒定低致敏特用大豆品種特異性CAPS分子標(biāo)記snp545和方法及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911341069.X
• 申請(qǐng)日: 2019-12-23
• 公開（公告）號(hào): CN110951907B
• 公開（公告）日: 2021-02-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉珊珊;宋波;張淑珍;徐鵬飛;羅亭亭;李明雪
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/6895
• 分類號(hào): C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標(biāo)事務(wù)所 23109
• 代理人: 岳泉清

一種鑒定低致敏特用大豆品種特異性CAPS分子標(biāo)記snp545和方法及其應(yīng)用，它涉及分子標(biāo)記領(lǐng)域，本發(fā)明提供一種鑒定低致敏特用大豆品種特異性CAPS分子標(biāo)記和方法及其應(yīng)用，所述的CAPS分子標(biāo)記的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本發(fā)明的snp545標(biāo)記用于鑒定低致敏特用大豆品種，所述的低致敏特用大豆品種為α?亞基缺失品種，為α?亞基缺失候選基因的挖掘與鑒定分析提供了良好的研究基礎(chǔ)。經(jīng)過(guò)多次檢驗(yàn)，結(jié)果穩(wěn)定可靠。本發(fā)明應(yīng)用于低致敏特用大豆選育領(lǐng)域。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分子標(biāo)記領(lǐng)域，具體涉及一種鑒定低致敏特用大豆品種的CAPS分子標(biāo)記和方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

大豆種子中的過(guò)敏原主要包括貯藏蛋白、結(jié)構(gòu)蛋白和防御相關(guān)蛋白三種，其中主要的致敏蛋白為貯藏蛋白。貯藏蛋白又按照密度梯度離心時(shí)的沉降系數(shù)分類，包括7S球蛋白、11S球蛋白、15S球蛋白及2S球蛋白。早在1934年，Duke等學(xué)者就指出，大豆是一種重要的食物致敏原，到2010年4月16日為止，致敏原數(shù)據(jù)庫(kù)已收錄38種大豆過(guò)敏原(http://www.allergenonline.org//)。種子結(jié)構(gòu)蛋白、貯藏蛋白和防御相關(guān)蛋白是主要的大豆致敏蛋白，其中屬于致敏蛋白貯藏蛋白的主要包括：Gly m Bd 28K、Gly m Bd 60K(β-伴大豆球蛋白α-亞基)和Gly m Bd 30K(P34)；結(jié)構(gòu)蛋白包括：Gly m 1(疏水蛋白)、Gly m 2(殼蛋白)、Gly m 3(抑制蛋白)等；防御相關(guān)蛋白包括凝集素多肽片段、病理相關(guān)蛋白、KSTI(胰蛋白酶抑制劑)等。大豆致敏蛋白亞基主要集中在7S球蛋白中，7S的α′，α和β3個(gè)亞基都是主要的大豆致敏源。大豆種子中7S球蛋白亞基的缺失，不僅可以降低大豆抗原含量減少過(guò)敏反應(yīng)，并且能夠改善大豆蛋白的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)、改變大豆蛋白的加工品質(zhì)。

Ogawa等學(xué)者1995年證明大豆7S球蛋白的α-亞基是大豆主要的致敏原，在對(duì)大豆過(guò)敏的人群中，對(duì)α-亞基過(guò)敏的約占25％。α-亞基在大豆子葉發(fā)育形成過(guò)程中細(xì)胞分裂終止后不久(大約授粉18-20天)開始積累，其分子量為72kD。氨基酸分析及溴化氫裂解分析結(jié)果表明：α-亞基內(nèi)含2個(gè)蛋氨酸殘基。遺傳學(xué)研究表明：α-亞基的缺失與否是獨(dú)立遺傳、自由組合的一對(duì)性狀，其中‘α-亞基正常型’為Cgy-2基因控制的顯性性狀，而‘α-亞基缺失’為cgy-2控制的隱性性狀。Salleh等的研究結(jié)果表明，在11S球蛋白含量一致的前提下，7S球蛋白的3個(gè)主要亞基對(duì)豆腐凝膠硬度有不同的影響，α-亞基對(duì)凝膠硬度的影響最小，αˊ亞基缺失型原料制作的豆腐凝膠硬度同比正常型和α-亞基缺失型原料豆腐的硬度值都大。亞缺失型大豆為低致敏大豆株系。目前，國(guó)內(nèi)外已經(jīng)獲得多種經(jīng)人工誘變或自然變異產(chǎn)生的具有7S球蛋白亞基缺失表現(xiàn)的育種材料。

我國(guó)大豆種質(zhì)資源豐富，上世紀(jì)末，我國(guó)對(duì)大豆種質(zhì)資源貯藏蛋白的研究?jī)H僅停留在對(duì)蛋白組分、氨基酸含量，或少量品種7S和11S含量分析上。進(jìn)入本世紀(jì)，國(guó)內(nèi)許多研究者開展了針對(duì)我國(guó)大豆種質(zhì)資源中7S和11S組分含量變異的分析,也有許多研究者通過(guò)篩選或誘變獲得了多種蛋白亞基缺失體材料，但利用這些材料通過(guò)聚合育種，創(chuàng)制各種致敏蛋白多亞基缺失組合類型的大豆新材料，進(jìn)行大豆?fàn)I養(yǎng)及加工品種改良的報(bào)道尚少。目前雖已有不同7S球蛋白亞基缺失體研究的相關(guān)報(bào)道，但在大豆7S球蛋白α-亞基缺失體研究方面還存在空白。國(guó)內(nèi)外尚沒有α-亞基缺失基因相關(guān)的高效的分子標(biāo)記，更沒有對(duì)α-亞基缺失相關(guān)基因的功能以及其分子調(diào)控機(jī)制方面的研究。