[發明專利]一類基于穩定同位素的高通量蛋白質組學定量試劑在審
| 申請號: | 201911337499.4 | 申請日: | 2019-12-23 |
| 公開(公告)號: | CN111024867A | 公開(公告)日: | 2020-04-17 |
| 發明(設計)人: | 李舒偉 | 申請(專利權)人: | 南京譜利健生物技術有限公司 |
| 主分類號: | G01N30/06 | 分類號: | G01N30/06;G01N30/72 |
| 代理公司: | 南京眾聯專利代理有限公司 32206 | 代理人: | 李雪萍 |
| 地址: | 210033 江蘇省南京市*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一類 基于 穩定 同位素 通量 蛋白質 定量 試劑 | ||
1.一類同量異位標簽試劑,其特征在于:同量異位標簽試劑包含10個化學結構完全相同的標簽,在每個標簽中的不同位置含有13C或15N同位素,10個標簽為:T-114、T-115N、T-115C、T-116N、T-116C、T-117N、T-118N、T-117C、T-118C、T-119。
2.如權利要求1所述的一類同量異位標簽試劑,其特征在于:包含穩定同位素結構,MS/MS可剪切鍵和能夠與多肽反應的基團,對多肽進行標記并定量;所述同量異位標簽試劑的每個標簽的結構包括下式:報告基團-平衡基團–活化基團,其中報告基團和平衡基團通過MS/MS可剪切鍵連接,活化基團與多肽的氨基反應形成穩定的酰胺鍵;每個標簽中的報告基團+平衡基團的質量是相同的。
3.如權利要求2所述的一類同量異位標簽試劑,其中一組同量異位標簽試劑的具體結構式如下結構A:
T-114、T-115N、T-115C、T-116N、T-116C、T-117N、T-118N、T-117C、T-118C、T-119結構式如下,其中星號表示此位置為相應的13C或者15N:
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4.如權利要求2所述的一類同量異位標簽試劑,其中一組同量異位標簽試劑的具體結構式如下結構B:
T-114、T-115N、T-115C、T-116N、T-116C、T-117N、T-118N、T-117C、T-118C、T-119結構式如下,其中星號表示此位置為相應的13C或者15N:
。
5.如權利要求2所述的一類同量異位標簽試劑,其中一組同量異位標簽試劑的具體結構式如下結構C:
T-114、T-115N、T-115C、T-116N、T-116C、T-117N、T-118N、T-117C、T-118C、T-119結構式如下,其中星號表示此位置為相應的13C或者15N:
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6.如權利要求2所述的一類同量異位標簽試劑,其特征在于:報告基團和平衡基團通過MS/MS可剪切鍵連接,報告基團的質量在114至119Da的范圍內,報告基團分別含有10種不同的同位素13C和15N的質量組合,平衡基團含有對應的13C和15N的同位素,報告基團和平衡基團的質量總和在各個試劑中是完全一致的。
7.如權利要求2所述的一類同量異位標簽試劑,其特征在于:每組同量異位標簽試劑含有13C和15N的10種化學結構完全相同的穩定同位素標簽,每個同量異位同位素標簽包含13C和/或15N同位素原子,同量異位標簽試劑結構包括下式:報告基團-平衡基團-活化基團;報告基團和平衡基團通過可剪切鍵連接,剪切鍵在MS/MS中優先斷裂,產生一系列報告基團離子,分別具有不同的分子式和質量,其報告基團離子的具體分子式和精確質量如下:
8.一類同量異位標簽試劑,其特征在于:同量異位標簽試劑含有13C和15N的等量異位同位素標簽,所述同量異位標簽試劑的化學結構包括下述結構D、結構E、結構F、結構G,結構H的其中一種或多種:
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9.一類同量異位標簽試劑,其特征在于:每組試劑可以采用結構A-H的一種結構,其包含的穩定同位素不限定于公開的位置,而是可以出現在該結構中的任何位置;
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10.一類多肽定量分析方法,其特征在于:采用權利要求1-9任意所述的同量異位標簽試劑對多肽進行標記并定量。
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