[發(fā)明專利]馬松染色試劑盒及其染色方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911335046.8
• 申請日: 2019-12-23
• 公開（公告）號: CN110926911A
• 公開（公告）日: 2020-03-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王守立;趙飛;沈剛
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州堪賽爾生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: G01N1/31
• 分類號: G01N1/31
• 代理公司: 蘇州隆恒知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32366
• 代理人: 周子軼

本發(fā)明公開了一種馬松染色試劑盒及其染色方法。所述馬松染色試劑盒包括蘇木素染液、麗春紅酸性品紅染液、苯胺藍(lán)染液、冰醋酸水溶液以及磷鉬酸水溶液。所述麗春紅酸性品紅染液的制備方法為：將4g麗春紅、2g酸性品紅溶于495ml蒸餾水中，得到溶液A，再向溶液A中加入5ml冰醋酸，獲得麗春紅酸性品紅染液；所述苯胺藍(lán)染液的制備方法為：將10g苯胺藍(lán)溶于490ml蒸餾水中，得到溶液B，再向溶液B中加入10ml冰醋酸，獲得苯胺藍(lán)染液；述冰醋酸水溶液的制備方法為：將10ml冰醋酸溶于490ml蒸餾水中，獲得冰醋酸水溶液；所述磷鉬酸水溶液的制備方法為：將5g磷鉬酸溶于500ml蒸餾水中，獲得磷鉬酸水溶液。采用本發(fā)明的方案具有試劑成本較低、使用方法簡單、染色效果佳等優(yōu)點。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及了生物技術(shù)領(lǐng)域，具體的是一種馬松染色試劑盒及其染色方法。

背景技術(shù)

結(jié)締組織(connective tissue)由細(xì)胞和大量細(xì)胞間質(zhì)構(gòu)成，結(jié)締組織的細(xì)胞間質(zhì)包括基質(zhì)、細(xì)絲狀的纖維和不斷循環(huán)更新的組織液，具有重要功能意義。

結(jié)締組織在動物體內(nèi)分布廣，種類多，包括固有結(jié)締組織(疏松結(jié)締組織、致密結(jié)締組織、網(wǎng)狀組織、脂肪組織)，血液、淋巴，軟骨和骨組織，它們都有共同的特征：它們都起源于胚胎性結(jié)締組織——間充質(zhì)。在它們的組成成分中除細(xì)胞外，還有大量非細(xì)胞物質(zhì)(無定形基質(zhì)和纖維)。

而纖維又包括膠原纖維、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維。在現(xiàn)有的病理分析技術(shù)中，為了明確膠原纖維的病理變化，常用Masson(馬松染色)等特殊染色方法對組織切片進(jìn)行染色。因此，研發(fā)出成本低廉、制備和使用方法簡單、染色效果良好的馬松染色液及染色方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員持續(xù)致力于解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，本發(fā)明實施例提供了一種馬松染色試劑盒及其染色方法，其用于提供使用方法簡單、染色效果良好的馬松染色試劑盒。

本申請實施例公開了：一種馬松染色試劑盒，包括蘇木素染液、麗春紅酸性品紅染液、苯胺藍(lán)染液、冰醋酸水溶液以及磷鉬酸水溶液，其中：

所述麗春紅酸性品紅染液的制備方法包括：將4g麗春紅、2g酸性品紅溶于495ml蒸餾水中，得到溶液A，再向溶液A中加入5ml冰醋酸，獲得麗春紅酸性品紅染液；

所述苯胺藍(lán)染液的制備方法包括：將10g苯胺藍(lán)溶于490ml蒸餾水中，得到溶液B，再向溶液B中加入10ml冰醋酸，獲得苯胺藍(lán)染液；

所述冰醋酸水溶液的制備方法包括：將10ml冰醋酸溶于490ml蒸餾水中，獲得冰醋酸水溶液；

所述磷鉬酸水溶液的制備方法包括：將5g磷鉬酸溶于500ml蒸餾水中，獲得磷鉬酸水溶液。

具體的，所述試劑盒中包括麗春紅酸性品紅染液、苯胺藍(lán)染液、冰醋酸水溶液以及磷鉬酸水溶液各15ml。

具體的，所述試劑盒中，所述蘇木素染液、麗春紅酸性品紅染液、苯胺藍(lán)染液、冰醋酸水溶液以及磷鉬酸水溶液分別采用滴瓶包裝。

本實施例還公開了一種馬松染色試劑盒染色的方法，包括以下步驟：

a.石蠟切片脫蠟至水，然后將石蠟切片中浸入所述蘇木素染液中2min；

b.將步驟a中獲得的石蠟切片浸入所述麗春紅酸性品紅染液中1min；

c.將步驟b中獲得的石蠟切片浸入所述冰醋酸水溶液中0.5～1min，然后用蒸餾水洗；

d.將步驟c中獲得的石蠟切片浸入所述磷鉬酸水溶液中分化3～8min；

e.將步驟d中獲得的石蠟切片浸入所述苯胺藍(lán)染液中30s；

f.用所述冰醋酸水溶液洗步驟e中獲得的石蠟切片30s；