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[發明專利]利用重組谷氨酸棒桿菌代謝甘露醇合成L-鳥氨酸的方法有效

專利信息
申請號: 201911334517.3 申請日: 2019-12-23
公開(公告)號: CN110951766B 公開(公告)日: 2023-02-24
發明(設計)人: 張斌;盛琦;江燕;徐心怡;唐忠 申請(專利權)人: 江西農業大學
主分類號: C12N15/77 分類號: C12N15/77;C12N15/53;C12P13/10;C12N1/21;C12R1/15
代理公司: 北京瑞盛銘杰知識產權代理事務所(普通合伙) 11617 代理人: 鄭海松
地址: 330045 江西省南*** 國省代碼: 江西;36
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摘要:
搜索關鍵詞: 利用 重組 谷氨酸 桿菌 代謝 甘露醇 合成 鳥氨酸 方法
【權利要求書】:

1.利用重組谷氨酸棒桿菌代謝甘露醇合成L-鳥氨酸的方法,其特征在于包括以下步驟:

(1)重組谷氨酸棒桿菌:構建含有敲除負調控蛋白MtlR同源上下臂的重組質粒,導入谷氨酸棒桿菌,敲除負調控蛋白MtlR的編碼基因mtlR;然后將強啟動子為PNCgl0824啟動子插入在mtlD基因上游非編碼區,強化表達甘露醇脫氫酶的編碼基因mtlD,獲得重組谷氨酸棒桿菌;

(2)好氧發酵合成L-鳥氨酸:將步驟(1)中獲得的重組谷氨酸棒桿菌接種于發酵培養基中進行好氧發酵合成L-鳥氨酸,谷氨酸棒桿菌的接種量為1-20體積%,發酵溫度為30℃;控制搖床轉速為250 rpm,發酵時間:72 h;發酵結束后收集發酵液,對所述發酵液的OD600測定與L-鳥氨酸濃度測定;

所述發酵培養基包含甘露醇、玉米漿、硫酸銨、MgSO4、KH2PO4、Na2HPO4、K2HPO4、MnSO4、FeSO4、CaCO3。

2.根據權利要求1所述利用重組谷氨酸棒桿菌代謝甘露醇合成L-鳥氨酸的方法,其特征在于所述發酵培養基中各組分的含量為:甘露醇 20-100 g/L、玉米漿 5-25 g/L、硫酸銨10-60g/L、MgSO4 0.2-5 g/L、KH2PO4 0.5-5 g/L、Na2HPO4 0.5-5 g/L、K2HPO4 0.5-5 g/L、MnSO4 0.001-1 g/L、FeSO4 0.001-1 g/L、CaCO3 10-30 g/L。

3.根據權利要求1所述利用重組谷氨酸棒桿菌代謝甘露醇合成L-鳥氨酸的方法,其特征在于所述發酵培養基中各組分的含量為:甘露醇80 g/L、玉米漿20 g/L、硫酸銨50g/L、MgSO42.5 g/L、KH2PO41 g/L、Na2HPO4 0.5 g/L、K2HPO40.5 g/L、MnSO40.02 g/L、FeSO4 0.02g/L、CaCO3 10 g/L。

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